植物中挥发性抗菌活性成分之研究.docVIP

植物中揮發性抗菌活性成分之研究 Studies on the antimicrobial volatile components from the plant 研究生：蘇凱馨 Kai_Hsin Sue 指導教授：黃卓治 Tzou-Chi Huang 【摘要】 本研究針對蓮花、左手香、台灣土肉桂樣品其揮發性成分分析，以GC和GC/MS分離及鑑定。利用水蒸汽蒸餾法、固相微量萃取法和靜態上部空隙萃取法，萃取利用紅花（N. rubra Roxb.）、藍花（N. carenlea Savigny）兩種不同顏色的品種及花瓣、花蕊、花粉和萼片四種不同的部位兩方面來比較揮發性成分，目前已鑑定出五十一種化學成分，也發現在花蕊、萼片及花瓣中揮發性香氣成份含量較花粉少。四種品種之左手香，目前已鑑定出五十五種化學成分，主要揮發性成分為香芹酚及β-丁香烯。不同海拔台灣土肉桂中發現，目前已鑑定出五十五種化學成分，主要揮發性成分為肉桂醛，並發現海拔愈高肉桂醛 cinnamaldehyde 含量愈多，海拔愈高乙酸肉桂酯 cinnamyl acetate 含量較低。 本研究針對植物中揮發性成分抗菌活性作探討，將蓮花、左手香、台灣土肉桂樣品，鑑定出其揮發性成分中具有活性者，如：carvacrol，β-caryophyllene，cinnamaldehyde，cinnamyl acetate，trans-cinnamic acid及cinnamyl alcohol。將其標準品以洋菜擴散法 agar diffusion method 針對六株細菌，三株酵母菌及四株黴菌，進行最小抑菌濃度測試 minimum inhibitory concentration，MIC ，結果發現carvacrol，cinnamaldehyde，trans-cinnamic acidBacillus subtilis， Listeria monocytogenes，Staphylococcus epidermidis，Flavobacterium，Pseudomonas aeruginosa，Salmonella typhimurium，Rhizoctonia solani，Fusarium oxysporum f.sp. melonis FOM-M2，Fusarium oxysporum f.sp. melonis FOM-M3，Fusarium oxysporum f.sp. melonis FOM-M9在最低抑制濃度 1–3 mM 可抑菌β-caryophyllene 、cinnamyl acetate則無抑制作用；在抗菌作用之研究中發現cinnamaldehyde具有α,β-unsaturated carbonyl group，可能針對細菌等生物中之胺基形成反應，故呈現強烈抗菌作用，進一步測試其癌細胞毒性試驗，以MTT分析法觀察，cinnamaldehyde及cinnamyl acetate對K562癌細胞生長之影響，以cinnamaldehyde對K562癌細胞株具有較強之毒殺作用，在100μM，癌細胞存活率僅存29.85%，我們利用不同的方法如流式細胞分析儀及電子顯微鏡來偵測細胞凋亡，發現有凋亡現象。 關鍵字: 香芹酚，肉桂醛，乙酸肉桂酯The aim of this study is to identify the volatiles and their antimicrobial activites of lotus flower Nelumbo nucifera , Plectlanthus, Cinnamomum osmophloeum Kaneh. Volatiles were extracted through three methods including steam distillation, solid-phase microextraction and headspace technique, and then characterized by gas chromatography equipped with mass detector before antimicrobial analysis. Results showed that, more than fifty-one volatiles were identified from petal, filament, pollen and sepal of two varieties in lotus flower. The volatiles compounds in the filaments, sepals and petals were found to be less than that