论文名称(中文) 过量麻醉剂异丙酚导致巨噬细胞经由肝醣合成酶激酶.docVIP

論文名稱 中文 過量麻醉劑異丙酚導致巨噬細胞經由肝醣合成酶激酶-3β媒介溶酶體/粒線體細胞凋亡 論文名稱 英文 Overdose Anesthetic Propofol Causes Glycogen Synthase Kinase-3β-mediated Lysosomal/Mitochondrial Apoptosis in Macrophages 研究生 中文 陳俞宏 研究生 英文 Yu-Hong Chen 中文摘要 異丙酚是一種短效性的靜脈注射麻醉劑，不僅具有麻醉作用，還包括抗氧化、保護神經和免疫調節的作用。異丙酚注輸症候群是給予過量的異丙酚所導致，此症狀會造成心肌細胞、骨骼肌細胞、神經細胞及免疫細胞死亡。然而，其中的分子機制依然尚未明瞭。肝醣合成酶激酶-3β GSK -3β 在細胞生長、發炎及凋亡中扮演多因子的角色。此研究中，為了找尋一個能防止與異丙酚注輸症候群相關細胞死亡的策略，我們假設過量異丙酚係透過肝醣合成酶激酶-3β 誘導巨噬細胞進行細胞凋亡。過量的異丙酚在老鼠的巨噬細胞RAW264.7和BV2會引起吞噬作用的抑制及細胞凋亡。異丙酚造成溶酶體胞膜通透性增加 LMP 及粒線體穿膜電位 MTP 減低，隨之導致細胞凋亡。粒線體穿膜電位的穩定者環孢靈和硫胱天門冬氨酸蛋白酶抑制劑的前處理降低異丙酚引起的細胞凋亡。此外，異丙酚誘導細胞自溶酵素B活化，而細胞自溶酵素B的抑制劑z-FA-fmk可以降低異丙酚引起的LMP、MTP減低和細胞凋亡。我們發現異丙酚導致Bcl-2家族蛋白表現量的失衡。藉由抑制劑藥物或慢病毒-基底短髮夾狀核醣核酸的方式抑制肝醣合成酶激酶-3β 可以阻止異丙酚引起的溶酶體胞膜通透性增加、粒線體穿膜電位減低和細胞凋亡。減低肝醣合成酶激酶-3β 可以回復異丙酚引起的Mcl-1降解及吞噬作用的抑制。同樣地，過度表現Mcl-1抵抗異丙酚引起的溶酶體/粒線體細胞凋亡。根據機制的研究，我們證明過量異丙酚藉由未知的機制抑制肝醣合成酶激酶-3β 的負向調節者如Akt、胞外訊息調控激酶和p70 S6激酶而活化肝醣合成酶激酶-3β。根據研究的結果，給予巨噬細胞過量異丙酚會透過抑制Akt、胞外訊息調控激酶和p70 S6激酶進而活化肝醣合成酶激酶-3β 使Mcl-1不穩定，隨後引發溶酶體功能失常、粒線體的損害和硫胱天門冬氨酸蛋白酶媒介的細胞凋亡訊息引起吞噬作用的抑制和細胞凋亡。綜觀而論，抑制肝醣合成酶激酶-3β 在臨床上可能可以提供做為一個新的有效方法去避免因異丙酚注輸症候群造成的免疫抑制及細胞死亡。 英文摘要 Propofol, a short-acting intravenous anesthetic agent, has not only sedative effects but also antioxidant, neuroprotective, and immunomodulatory effects. Propofol infusion syndrome is caused by overdose treatment of propofol which causes cell death including cardiomyocytes, skeletal muscle cells, neuronal cells, and immune cells; however, its molecular mechanism remains unclear. Glycogen synthase kinase-3β GSK -3β plays multifactorial roles in cell growth, inflammation, and apoptosis. In searching a strategy for preventing propofol infusion syndrome-associated cell death, in this study, we hypothesize that overdose treatment of propofol induces macrophages undergoing cell apoptosis through GSK-3β. Overdose propofol caused phagocytic inhibition and apoptosis in murine macrophages RAW264.7 as well as BV2. Propofol caused lysosomal membrane permeabilization LMP and loss of mitochondrial transmembra