酸放散、热放散联合检测新生儿ABO溶血病结果分析.docVIP

酸放散、热放散联合检测新生儿ABO溶血病结果分析 　　摘 要 目的 分析酸放散和热放散2种方法联合检测新生儿ABO溶血病结果，以供临床参考。方法 选取462例检测ABO溶血病的标本进行抗体释放试验，采用酸放散和热放散2种方法同时进行，放散液选用75μL，检验报告结果取阳性者。结果 2种方法联合检测阳性病例有366例，阳性率为79.22%；酸放散阳性320例，阳性率69.26%；热放散阳性343例，阳性率74.24%；2种方法联合检测阳性率较酸放散试验阳性率高，P0.05。结论 酸放散与热放散同时应用可提高阳性率。日龄在1～3d、7d后、A型患儿采用热放散，4～6d采用酸放散，可提高新生儿ABO-HDN阳性检出率，减少漏检。 　　关键词 酸放散 热放散 阳性率 漏检 　　新生儿溶血病是母婴血型不合导致免疫性溶血性疾病，其主要是ABO血型和Rh血型不合2种，临床表现为水肿、黄疸、贫血、肝脾肿大，严重者可发生胆红素脑病，造成生命威胁或不可逆转神经系统后遗症 [1～3]，降低生活质量。我国以ABO-HDN多见，不及时诊治往往造成严重后果。临床上早期诊治可减少或阻断胆红素脑病的发生[4]。本文探讨抗体释放试验采用酸放散和热放散2种方法联检的临床诊断价值，现报告如下。 　　1 资料与方法 　　1.1 资料来源 　　2011年11月-2012年6月我院新生儿科住院和婴儿室ABO血型不合的高胆红素血症或疑似ABO溶血患儿共462例，日龄0～23d，男250例，女212例。OA型189例，OB型273例。 　　1.2 仪器与试剂 　　抗-A、抗-B标准血清、ABO标准红细胞、Rh（D）血型鉴定试剂，由上海血液生物医药有限公司生产。微柱凝胶血型卡、37℃孵育器、卡式离心机、Ⅱ号稀释液、DiaCidel放散液、DiaCidel洗涤液为瑞士DiaMed公司生产。日产久保田配血专用离心机。 　　1.3 方法 　　用EDTA（乙二胺四乙酸）抗凝管抽取3～4mL静脉血，摇匀离心分离血浆后作ABO、Rh血型鉴定（盐水试管法或微柱凝胶血型卡式法）及ABO溶血病抗体释放试验。抗体释放试验： 取压积红细胞2mL分2管进行洗涤，一管用于酸放散、一管用于热放散；酸放散采用DiaCidel洗涤液洗涤（或盐水洗涤）4次，热放散用生理盐水选涤4次，每次以1000 r/ min 离心2 min，每次尽量抽尽上清液弃去，最后1次留少量清洁的上清液作对照管；用吸管测量压积细胞后，酸放散加入等量的DiaCidel放散液，离心1 min （1000 r/ min），取分离出的上清液，即为病人红细胞的放散液，加入DiaCidel缓冲液摇匀至蓝色备用；洗涤好的热放散管加入与压积红细胞相等的生理盐水后摇匀，放入56℃水浴箱5～7min（不要盖）后取出，离心（1000 r/min） 1～2 min，取出上清即为红细胞的热放散液。取微柱凝胶卡分别标记酸放散、热放散、上清对照、Oc字样，标记好后在各孔（Oc孔加入Oc）内加入0.8%～1.0%与病人血型相同的标准红细胞悬液50μL，再加入相应的放散液75μL（上清孔内加入75μL上清液，Oc孔加入热放散液或酸放散液75μL）后放入孵育器孵育15min，离心10 min观察结果，结果报告取阳性者。 　　1.4 统计学分析 　　PEMS 3.1软件包进行组间比较，P0.05有统计学意义。 　　2 结果 　　2种方法联合检测阳性病例为366例，阳性率为79.22%；酸放散阳性320例，阳性率69.26%；热放散阳性343例，阳性率74.24%；经统计学分析，2种方法联合检测阳性率高，与酸放散比P0.05。462例新生儿ABO溶血病抗体释放试验检测结果（见表1）， 酸放散与热放散检测不一致的病例凝集强度比较（见表2）。 　　统计学分析： 　　（1）.酸放散阳性与热放散阳性整体比较：x2=2.8247，P=0.0928 　　（2）. 酸放散、热放散联合阳性与酸放散比较：x2=11.9753，P=0.0005；与热放散比较 ：x2= 3.2066，P=0.0733 　　（3）.日龄： 酸放散与热放散比较：①比较x2=3.8728，P=0.0491；②比较x2=1.1097，P=0.292； ③比较x2 =1.1868，P=0.2760 　　（4）.血型比较：A型酸放散与热放散比较x2=4.3016，P=0.0381，B型酸放散与热放散比较x2=0.3985，P=0.5279 　　3 讨论 　　新生儿ABO-HDN血清学检测主要是新生儿溶血三项试验，即直接Coomb，s试验（DAT）、游离抗体试验和抗体释放试验，3项试验中抗体释放试验敏感度最高，是最可靠的检测方法[5]，也是判定HDN最有力的证据[6]。抗体释放试验是通