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一、目的 掌握显微镜红细胞计数的原理及操作方法。 二、原理 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数,充入计数池后,在显微镜下计数一定体积内的红细胞数量,经换算求出每升血液中的红细胞数。 红细胞计数 三、器材 试管、试管架、加样枪、微量吸管、胶吸头、干脱脂棉、改良计数板、血盖片、显微镜 四、试剂 生理盐水 五、标本 EDTA盐抗凝血 六、操 作 1. 准备计数板:采用推压法从计数板下缘向前平推血盖片,将其盖在计数池上。 2. 加稀释液: 取小试管1支,加稀释液2.0ml。 3. 加血:用微量吸管吸取抗凝血10μl,擦去管外余血,轻轻加至红细胞稀释液底再轻吸上清液清洗吸管2~3次,混匀。 六、操 作 4. 充池:用微量吸管将红细胞悬液充入计数池, 室温下平放3~5分钟后于显微镜下计数。 5. 计数:用高倍镜依次计数中央大方格内4角 和正中5个中方格内的红细胞数。 白细胞计数 一、目的 掌握显微镜白细胞计数的方法。 二、原理 用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数,同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液冲入计数池后,在显微镜下计数一定体积内的白细胞数,经换算求出每升血液中的白细胞数。 三、器材 显微镜、改良计数板、血盖片、试管、微量 吸管、加样枪、乳胶吸头、纱布 四、试剂 白细胞稀释液 五、标本 EDTA盐抗凝血 六、操作 1. 加稀释液 用加样枪吸取白细胞稀释液0.38ml于小试管中。 2. 加血 用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血20μl,擦去管外余血,轻轻加至白细胞稀释液底部,再轻吸上清液清洗吸管2~3次,混匀。 3. 充池 混匀后用微量吸管将细胞悬液冲入计数池,室温下平放3~5分钟,待细胞下沉后于显微镜下计数。 4. 计数 用低倍镜依次计数四角4个大方格内的白细胞数。 5. 计算 白细胞/L N/4×10×20×106 N/20×109/L 6. 报告方式 X.XX×109/L。 七、注意事项 1. 充池前应将白细胞悬液充分混匀。 2.在充池时要一次完成,不能产生满溢、气泡或充池不足及充液后玻片移动的现象。 3. 白细胞在计数池中若分布不均,各大方格间细胞计数不得相差8个以上,应重新计数。 4. 白细胞数量过多时,可采取加大稀释倍数的方法。 5. 白细胞稀释液不能破坏有核红细胞,它可使白细胞计数偏高,此时应计算白细胞校正值。 1.保证红细胞计数准确的关键环节是什么? 2.假定某次白细胞计数为6×109/L,其中分类100个白细胞有20个有核红细胞,问白细胞的实际数量是多少 八、作业 * 谢谢
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