在以3-磷酸甘油酸、ATP、NAD+为底物的反应液中,加入3-磷酸甘油醛脱氢酶后,于340nm处测定OD值变化(反应NAD+向NADH的转化),从而计算酶活力 酶的活力单位定义为:每分钟消耗1nmol NAD+所需要的酶量 酶活力= OD值变化量×1000 6.2×反应时间×酶量 OD变化量指某一时刻读取值与过一定反应时间再读取的OD值之差;6.2是NADH 1000nmol/ml时的消光系数 3、酶的比活力 比活力(比活性)是指每单位质量样品中的酶活力,即每mg蛋白质中所含的U数或每kg蛋白质中含的kat数; 有时用单位体积中酶的活力单位表示比活力。 酶的比活力即表示酶的含量(纯度),是表示酶制剂纯度的一个指标。 如在酶的提纯过程中,随着酶逐步被纯化,其比活力也在逐步增加。 别构酶的脱敏作用 别构酶经加热或用化学试剂等处理,可引起别构酶解离,失去调节活性,称为脱敏作用,脱敏后的酶表现为米氏酶的动力学 [Asp] 天冬氨酸转氨甲酰酶用对羟汞苯甲酸处理 别构酶的别构作用的学说 主要有两个学说: 协同模型(齐变模型,MWC)是由J.Monod,J.Wyman和J.P.Chengeux三人提出,所以以三人名字的首字命名 序变模型(循序模型,KNF )由D.Koshland等三人提出,也是以三人首字母命名 齐变模型 别构酶的所有亚基或者全部呈坚固紧密的、不利于结合底物的“
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