选修3第二、三章克隆技术胚胎工程精读.ppt

选 修 3 第二、三章克隆技术 胚胎工程 你认为培养基应有哪些成分? 你认为培养基应该是哪种物理状态? 与无土栽培培养液比较 生根发芽能力的胚状体用人工种皮(藻酸钠)包被 人工种子. （1）快速繁殖,培育无病毒植物(植物克隆,珍稀、濒危物种). 植物体细胞杂交 原代培养与传代培养 1、克隆培养法（细胞克隆） 把一个单细胞从细胞群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术。 提高细胞克隆形成率的措施: (1)选择适宜的培养基、添加动物血清 (2)以滋养细胞支持生长 (3)激素刺激（如胰岛素等） (4)使用CO2培养箱调节pH 植物组织培养和动物细胞培养的比较P200 2、动物细胞融合技术及应用 细胞融合： 指用自然或人工方法,使两个或多个不同的细胞融合成一个细胞的过程。 不同基因型的细胞之间的融合就是细胞杂交。 诱导融合的因素 生物法：灭活的仙台病毒诱导融合 利用灭活仙台病毒是动物细胞融合所特有的。 这是由于病毒的磷脂外衣与动物细胞的膜十分相似的缘故。病毒外壳上的某些糖蛋白可能还有促进细胞融合的功能。 化学法：聚乙二醇诱导融合 因为聚乙二醇易得、简便，且融合效果稳定，是目前应用最广泛的方法。 物理法：电激、激光诱导融合 动物细胞融合技术的应用 由于细胞杂交中染色体容易丢失，因此利用杂交细胞检测特定染色体丢失与特定基因产物减少的对应关系，可以进行基因定位。 利用杂交瘤技术，制备单克隆抗体。 单克隆抗体 需要解决的问题： B淋巴细胞如何在体外培养条件下无限增殖 解决的方法： 利用动物细胞融合技术，使B淋巴细胞与一种能够在体外无限增殖的细胞融合 单克隆抗体 ——极富创造性的方案 动物免疫 分离B淋巴细胞 细胞融合——淋巴细胞杂交瘤的制备 杂交瘤细胞的筛选 克隆能产生抗体的细胞 单克隆抗体的纯化 单克隆抗体的制备 单克隆抗体的应用 疾病诊断、治疗和预防——如单抗诊断盒 体外受精 胚胎体外培养 胚胎移植 胚胎分割 胚胎干细胞培养 一、体外受精和胚胎体外培养 体外受精 概念：将受精卵在人工环境下培养成早期胚胎。 培养液：（不同时期成分不同） 水、无机盐、有机物、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等。 二、胚胎移植 胚胎移植 充分发挥雌性个体的繁殖潜力 缩短供体本身的繁殖周期 保持供体优良特性 大规模繁殖 节约成本与费用 可用于保护珍稀动物 三、胚胎分割 概念:指借助显微操作技术（采用机械方法）将早期胚胎切割成几等份，再移植到代孕母子宫，产生同卵多仔后代的技术。 特点: 胚胎分割的基本过程 胚胎移入培养液； 分割胚胎（机械法、酶处理）； 直接移植胚胎给受体或体外培养到囊胚阶段再移植； 着床产仔。 概念:是由囊胚中分离出来的一类细胞，是一种未分化的，具有发育全能性和二倍体核型的细胞。即内细胞团的细胞。 胚胎工程概念 胚胎工程指对动物的早期胚胎所进行的多种显微操作和处理技术，如体外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。 受精后7天。胚芽完成着陆,微微嵌入子宫内膜。此时它分裂发育为几百个细胞。 受精后的第三星期别看这小小的胚胎才2毫米长，但它却已具备发育成全身各个器官的原始结构：外、中、 内三个胚层了 受精后6星期，与其说像人还不如说像鱼。6毫米长的小生命已经出现脑、脊柱、心脏和肝脏了。这时，胚胎的心跳每分钟140—150下，是母亲心跳的两倍。 人类胚胎第8周时在子宫内的照片 此时胎儿已长到20周，他移动手臂，把手指 放在唇边，这可以促进它对吮吸的反映 。 第二节 胚胎工程 研究的重要内容： （技术手段） 研究的对象： 高等脊椎动物，特别是哺乳动物 概 念： 通常指各种胚胎技术操作。 英国人W·希普于1890年在剑桥大学将纯种安哥拉兔的早期胚胎移植到一只已和同种交配的比利时兔的输卵管内。结果生出4只比利时兔和2只由胚胎发育而成的安哥拉兔。 这是世界上第一例胚胎移植，胚胎移植技术由此创始。 安哥拉兔 比利时兔 如何利用普通的比利时兔，快速地获得大量的具有性状优良的安哥拉兔呢？ 选择 供体母牛 受体母牛 ……同期发情处理*…… 超数排卵* 供体公牛 配种 取出早期胚胎 质量检查、培养 胚胎移植 妊娠检查 分娩（胚胎移植的犊牛） 胚胎工程的过程 未配种 概念：采取雌性动物的卵细胞和雄性动物的精子，使其在试管受精。 过程： （1）精子的收集和获能； （2）卵母细胞的收集和培养； （3）获能精子和卵细胞的受精。 ①精子的收集和获能 1