3-13口七核酸结构.ppt

增色效应机理： 核酸变性时由分子内氢键破坏，2条核苷酸链解开，原来重叠在分子内部的碱基得以暴露，导致变性DNA260nm紫外线吸收值发生升高的现象。 核酸变性 熔解温度 （变性温度，Tm ） DNA加热变性，其260nm紫外线吸收值达最大吸收值一半时的温度 Tm值与CG含量成正比 Tm范围：85-950C Tm值与DNA溶液中离子强度成正比 （DNA样品不易保存在纯水中） 熔解温度（melting temperature) 核酸复性 适当条件 变性DNA 双螺旋DNA (两条单链) 退火（annealing) 缓慢冷却(Tm-25℃) 热变性DNA 双螺旋DNA 影响因素： DNA浓度---DNA浓度高，复性快 DNA分子---DNA分子大，复性慢 温度------温度高，易变性 温度低，易错配 2、复性（renaturation） renaturation denaturation 3、杂交（hybridization） 具有互补序列的、两条不同来源的单链核 酸分子，按碱基配对原则结合在一起，生成新 的DNA-DNA、RNA-RNA、DAN-RNA双链的过程。 是分子生物学研究中常用的技术之一。 杂交 不同种类DNA单链/RNA 碱基配对