分子标记技术在甘蓝型油菜资源遗传多样性研究中的应用进展.docVIP

分子标记技术在甘蓝型油菜资源 遗传多样性研究中的应用进展 摘要:分子标记是一种新类型的遗传标记，作为研究生物遗传变异和进化关系的重要手段，其快速发展与应用对作物分子生物学和生物技术的发展起着巨大的推动作用。通过综述多种分子标记技术的原理、一般特点、和检测技术及在甘蓝型油菜遗传研究中的应用现状，并对分子标记技术的应用前景予以展望。概括了常用分子标记RFLP、AFLP、RAPD、SSR和新型分子标记SRAP、EST在甘蓝型油菜遗传多样性研究中的应用。 关键词:分子标记；甘蓝型油莱；遗传多样性 油菜是我国最重要的油料作物之一，2007年油菜种植面积占油料作物总面积的50％，产量占油料作物总产量的41％。菜籽油是我国传统的食用油，年产量在450万吨左右，占国产植物油总量的40％以上，年消费量占国内植物油总消费量的19.7％，在食用油市场中占有举足轻重的地位。 20世纪50年代以前，我国油菜栽培以白菜型和芥菜型品种为主，这些品种具有早熟、耐寒等特点，但籽粒小、抗病性差、产量低。新中国成立后，我国确定了以发展甘蓝型油菜(从日本引种，又名胜利油菜)为主的生产方向，通过对甘蓝型油菜进行选育，逐步更换了生产上产量较低的白菜型和芥菜型农家油菜品种。甘蓝型油菜品种的推广和栽培技术水平的不断提高，使我国油菜生产在面积、产量和效益上均提高到了一个新的历史水平。目前，“杂优+双低”甘蓝型油菜的选育是我国油菜育种和推广的主要方向。 遗传多样性研究有益于正确制定油菜遗传资源的收集和原位保存的策略，是改良油菜品种的基础。从分子水平上揭示品种之间的遗传变异成为一项倍受全球重视且具有重要现实意义的工作。20世纪80年代发展起来的DNA分子标记是以DNA或mRNA的多态性为基础的遗传标记，在油菜育种、品质鉴定以及遗传图谱的绘制、辅助选择育种等方面均得到了广泛应用和深入研究，为开发油菜新品种、提高油菜产量、改善油菜品质、增强油菜抗性提供了空前的发展机遇。以下综述了近年来分子标记技术在我国甘蓝型油菜资源遗传多样性研究中的应用与研究进展，以期为相关研究提供参考。 1 RAPD、RFLP和AFLP标记的应用 我国最早进行甘蓝型油菜分子标记遗传多样性研究的是华中农业大学的孟金陵等，他们利用RFLP标记分析了59份甘蓝型油菜品种的遗传差异，结果表明，甘蓝型油菜的多态性水平很高，品种间存在丰富的遗传变异，并且发现供试材料的聚类分组与其来源系谱基本相同。沈金雄等运用AFLP和RAPD标记对甘蓝型油菜自交不亲和系及22个不同来源的父本的遗传多样性及其与杂种优势的关系进行了分析，结果表明，自交不亲和系可分为2组，父本可分为5组 。张学昆等运用RAPD标记分析了甘蓝型黄籽油菜和种皮色素遗传多样性，发现甘蓝型黄籽油菜DNA存在着丰富的多态性 。 2 SSR标记的应用 由于RAPD稳定性差，AFLP和RFLP操作繁琐、成本高，且需使用放射性元素，标记的多态性也不及SSR标记，所以目前在甘蓝型油菜遗传多样性研究中应用最多的是SSR标记。聂平等利用SSR标记研究了35个甘蓝型油菜(17个春性品种(系)和l5个半冬性品种(系)以及3个春性品系与半冬性品系杂交选育出来的品系)的遗传多样性及其亲缘关系，结果表明，春性和半冬性品种(系)的遗传差异较大。姚艳梅等利用39对SSR标记研究了60个甘蓝型油菜与白菜型油菜种间杂交培育出的特早熟春性甘蓝型油菜品系及3个亲本的遗传多样性及其亲缘关系，共扩增出145个多态性片段，聚类分析结果表明，利用甘蓝型油菜与白菜型油菜种间杂交创造出来的新型甘蓝型油菜品系具有丰富的遗传多样性，且与甘蓝型亲本具有一定的遗传差异。刘平武等用SSR技术对98份甘蓝型油菜人工合成种与46份甘蓝型油菜品种(系)进行遗传多样性分析，聚类分析与主成分分析结果表明，甘蓝型油菜人工合成种遗传多样性十分丰富。因此通过人工合成甘蓝型油菜可以充分利用白菜型油菜和甘蓝丰富的遗传资源，拓展甘蓝型油菜的遗传基础。雷天刚等利用42对SSR引物对19个甘蓝型黄籽油菜品种(系)进行遗传多样性分析，共检测出336个等位基因，每对引物在不同品系间的等位基因数在2～21之间，平均位点为8个，位点多态性信息含量为0．17～0．85，平均为0．73。陈碧云等以2006～2007年全国冬油菜区试的89份参试品种为材料，运用筛选确定的25对SSR引物对这些品种进行分子标记分析，共获得106个多态性片段，遗传聚类和主成分分析结果显示，杂交种的多样性水平明显高于常规种；长江中游区品种(品系)遗传多样性指数最高，长江上游区和下游区次之，黄淮区最低。徐新福等从重庆市油菜工程技术研究中心的甘蓝型油菜骨干亲本中随机选取了32份材料和10份来源于部分研究材料的向源株系或反交组合用于SSR多态性研究，结果