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第十三章 基因重组与分子生物学技术 第二节 基因重组技术 基因重组(gene recombination)是指DNA片段在细胞内、细胞间，甚至在不同物种之间进行交换，交换后的片段仍然具有复制和表达的功能。 一、 基因工程主要步骤 ①载体和目的基因的分离； ②载体和目的基因的切断； ③载体和目的基因的重组； ④重组DNA的转化和扩增； ⑤重组DNA的筛选和鉴定。 二 重组DNA中的工具酶 1、限制性核酸内切酶 可以识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA，被称为基因工程的手术刀 (一)、限制性核酸内切酶的命名（自学） 按酶的来源的属、种名而定，取属名的第一个字母与种名的头两个字母组成的三个斜体字母作略语表示；如有株名，再加上一个字母，其后再按发现的先后写上罗马数字。例如：从流感嗜血杆菌d株(Haemophilus influenzae d)中先后分离到3种限制酶，则分别命名为HindⅠ、HindⅡ和HindⅢ。 （二）、限制性核酸内切酶的分类 （自学） 按限制酶的组成、与修饰酶活性关系，切断核酸的情况不同，分为Ⅰ、 Ⅱ、 Ⅲ三类： Ⅱ类限制性核酸内切酶的特点： （自学） 1、只有限制性活性，无甲基化修饰活性。 2、切割DNA特异性最强，且就在识别位点范围内切断DNA。 3、仅需Mg?2+参与，无需AT