第一章蛋白质简析.ppt

BPG的生理作用 二、蛋白质的分子大小与分子量的测定 蛋白质的分子量的范围：6×103～1×106 Da。 根据化学组成测定最低分子量 凝胶过滤层析的洗脱曲线  （五）SDS法测定Mr 聚丙烯酰胺凝胶电泳具有较高分辨率，用它分离、检测蛋白质混合样品，主要是根据各蛋白质各组分的电泳迁移率的不同。这种差异就蛋白质分子本身而言，主要与其所带净电荷以及分子量和形状有关。 当电泳体系中含有一定浓度的十二烷基硫酸钠（SDS）时，则得电泳迁移率的大小只取决于蛋白质的分子量，从而可直接由电泳迁移率推算出蛋白质的分子量。 平板电泳装置 垂直板电泳装置 在蛋白质水溶液中，加入少量的中性盐，如硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等，会增加蛋白质分子表面的电荷，增强蛋白质分子与水分子的作用，从而使蛋白质在水溶液中的溶解度增大。这种现象称为盐溶 五、蛋白质的分离纯化方法 1.透析：利用半透膜的选择通透性来纯化蛋白质等大分子物质的过程叫透析。 2. 超过滤：是利用压力或离心力，强行使水和其他小分子溶质通过半透膜，而蛋白质分子被截留在膜上，以达到浓缩和脱盐的目的，有时要用切向流过滤法。 （二）利用溶解度差别的纯化方法 影响蛋白质溶解度的外部因素很多，其中主要有：溶液的pH、离子强度、介电常数和温度。溶解度归根结底取决于