细胞生物学期末复习【参考】.docVIP

绪论 细胞的大小及体积的恒定取决于：1.体积与表面积的关系 2.细胞内关键分子的浓度 真核细胞膜的结构体系：生物膜体系；细胞骨架体系；遗传信息表达体系 第二章 细胞生物学研究方法 1.分辨率：r=0.61λ/n sinα 提高分辨率（放大倍数）：减小λ；增大角孔径越大；增大介质折射率； 显微镜结构：①照明系统 ②光学放大系统 ③机械装置 倒置显微镜不同点在于物镜与照明系统的位置颠倒，用于显微操作。 电子显微镜：透射电子显微镜、扫描电子显微镜 细胞膜的不对称性研究方法：冷冻蚀刻技术 细胞系（cell line）：原代培养细胞经首次传代成功即为细胞系。 细胞株（cell strain）：从培养细胞中筛选出的具有特定性质或标志的细胞群。 克隆（clone）：指由同一个原始细胞通过有丝分裂产生的遗传性状一致的细胞群。 动物细胞培养方法：贴壁培养、悬浮培养 培养特性：细胞贴壁、接触抑制 离心分离技术：速度离心、等密度离心 速度离心：用途：分离密度相近而大小不等的细胞或细胞器。 原理：被分离物质体积的差异 速度离心分为差速离心和移动区带离心 差速离心：特点：介质密度均一；速度由低向高，逐级离心。 移动区带离心：介质密度较低，介质的最大密度应小于被分离生物颗粒的最小密度。 原理：介质密度梯度平缓，分离物按各自的沉降系数以不同的速度沉降而达到分离。 等密度离心：用途：分离密度不等的颗粒。 原理：样品各成分在连续梯度的介质中经过一定时间的离心则沉降到与自身密度相等的介质处，并停留在那里达到平衡，从而将不同密度的成分分离。 分离细胞的组分或生物大分子操作原则： 体积和沉降系数差别大，差速离心；密度差别大，密度梯度离心 层析分离技术：分离蛋白质 ⑴凝胶过滤层析：根据蛋白质的大小和形状 ⑵亲和层析：根据生物分子间的特异结合 ⑶离子交换层析：根据蛋白质所带电荷的差异 PCR技术：聚合酶链式反应，用于扩增目的DNA 细胞质膜与跨膜运输 细胞质膜: 膜脂+膜糖+膜蛋白 膜脂主要包括磷脂、鞘脂和胆固醇三种类型。 脂质体：能够在水溶液中自我装配成脂双层的球状结构，这种结构称为~ 脂质体可用作生物膜的研究模型，并可作为生物大分子与药物的运载体，因此脂质体不仅是研究膜脂与膜蛋白及其生物学性质的极好材料，同时在基因转移药物治疗方面有着诱人的应用前景。 膜糖：细胞质膜上所有膜糖都位于质膜外表面，内膜中的膜糖则位于内表面 ABO血型抗原是一种糖脂, 其寡多糖部分具有决定抗原特异性的作用。ABO血型决定子是短的、分支寡糖链，A血型的人具有一种酶，能将N-乙酰半乳糖胺添加到糖链末端；B血型的人具有在糖链末端添加半乳糖的酶，AB血型的人具有上述两种酶；O血型的人缺少上述两种酶。 膜蛋白：整合蛋白、外周蛋白、脂锚定蛋白 跨膜蛋白（整合蛋白）的跨膜区为一般为α螺旋, 也有的是β折叠，如孔蛋白； 外周蛋白可用高盐或碱性pH条件分离；最容易分离出来。 6膜蛋白功能：.运输蛋白：转运特殊的分子和离子进出细胞；酶：催化相关的代谢反应; 连接蛋白：连接作用；受体：起信号接收和传递作用。 膜蛋白研究方法：⑴膜蛋白分离：用去垢剂分离小的跨膜蛋白 离子型去垢剂十二烷基磺酸钠SDS：可使细胞膜崩溃，并与膜蛋白疏水部分结合，而且破坏膜内部蛋白非共价键，使蛋白质变性，故不宜用于分离膜蛋白。 非离子型去垢剂Triton-X100：是常用温和型去垢剂，溶解膜脂，蛋白质不变性。 ⑵膜蛋白在膜中位置测定：对蛋白质进行标记或修饰实验 ⑶膜蛋白功能测定：脂质体法 细胞膜的特性：⑴膜不对称性：表现在膜脂分布、膜蛋白分布、膜糖分布的不对称性 研究方法：冷冻断裂（蚀刻）技术、放射性标记法、脂酶处理法 ⑵膜的流动性：由脂和蛋白质的流动引起 研究方法：人鼠细胞融合实验、淋巴细胞的成斑和成帽反应、荧光漂白恢 复、电子自旋共振谱技术 影响膜流动性的因素：了解（选择题） ⑴胆固醇：相变温度以上，胆固醇的含量增加会降低膜的流动性；相变温度以下则相反 ⑵脂肪酸链的饱和度：脂肪酸链所含双键越多越不饱和，使膜流动性增加。 ⑶脂肪酸链的链长：长链脂肪酸相变温度高，膜流动性降低。 ⑷卵磷脂/鞘磷脂：该比例高则膜流动性增加。 ⑸相变温度越高，流动性越弱。 物质运输种类：⑴小分子—穿膜运输：被动运输：简单扩散、协助扩散；主动运输 ⑵大分子—膜泡运输：内吞作用：吞噬作用、胞饮作用；外排作用 物质穿透能力（选择题） ⑴脂溶性越强越易直接穿