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2016-11-27 发布于河北
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5DNA和蛋白质技术

生物技术实践专题 ——DNA和蛋白质技术主讲教师：毕诗秀课题1：DNA的粗提取和鉴定【实验原理】 1.DNA粗提取的原理： 2.进一步提纯DNA的原理： 3.DNA鉴定的原理：【实验流程】 [来源:学科网] 一、实验材料的选择 DNA含量高、易破碎且无颜色干扰的生物组织最好思考：现提供如下实验材料，请从中选择适合的材料，用于DNA粗提取和鉴定，并阐述你选择的理由。二、破碎细胞，获取含DNA 的滤液 1.破碎动物细胞—渗透吸水的原理 2.破碎植物细胞：冷冻处理幼嫩植物材料→研磨：破碎细胞研磨液主要成分： SDS（洗涤剂）：使蛋白质变性，瓦解细胞膜，同时分离蛋白质与DNA EDTA （DNA酶抑制剂）：抑制DNA酶活性，防止DNA水解缓冲体系（Tris-HCl）三、去除滤液中的杂质 1.过滤获取核物质（滤液） 2.溶解细胞内的DNA和其他物质向滤液中加入2mol/L的NaCl溶液的作用是什么？用玻璃棒沿一个方向快速搅拌的目的是什么？[来源:学.科.网Z.X.X.K] 3.析出含DNA的粘稠物（去除杂质，粗提取DNA）沿烧杯壁缓慢加蒸馏水的目的？何时停止加蒸馏水？ 4.滤取含DNA的粘稠物四、进一步提纯DNA 1.向DNA的粘稠物中加2mol/L的NaCl溶液再溶解DNA 2.获取含杂质少的DNA（进一步提纯DNA）五、将DNA丝状物溶解后进行鉴定[来源:学.科.网Z.X.X.K] 总结DNA粗提取和鉴定实验步骤[来源:学科网ZXXK] 课题2：多聚酶链式反应扩增DNA片段【实验原理】条件：子链合成方向：