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江苏省血培养实验室操作指南
江苏省血培养实验室操作指南 (试行)
目 录
血培养的临床意义
血流感染定义
血培养的临床重要性
样本采集和运送
血培养送检指征
采血时机
血培养的次数
采血量
血液标本在需氧瓶和厌氧瓶中的分配
采血要求
标本的运送要求和拒收标准
第三节 血培养标本分离病原菌的关键要素
采血量
血-肉汤比例
培养基的选择
孵育条件
培养周期
培养瓶摇动
监控频率
第四节 特殊类型的血培养
真菌血培养
分枝杆菌血培养
导管相关的血流感染(CRBSI)
细菌性心内膜炎
结果报告
培养结果报告原则
培养结果的分级报告制度
第六节 血培养的质量控制
检测前的质量保证
分析中质量保证
分析后的质量保证
第一节 血培养的临床意义
一、血流感染定义 :是指各种病原微生物侵入血循环,在血液中繁殖,释放毒素和代谢产物,并诱导细胞因子释放,引起全身感染、中毒和全身炎症反应(SIRS),进一步导致血压下降、凝血和纤溶系统的改变,引起全身多器官功能障碍综合征(MODS),是一种严重的全身感染性疾病。
二、、血培养的临床重要性:病人血流中存在活的微生物对诊断和预后都有重要的作用,血培养阳性是评估或确认患者患有感染的重要依据,也为抗生素敏感性试验提供了病原学依据。从预后的角度看,分离到具有临床意义病原菌的血培养意味着宿主的防御机制和(或)过往的临床治疗手段不能将原发部位感染的病原菌(或感染灶)清除,同时从血中分离的病原菌类型对预后也有重要的提示信息。
样本采集和运送
一、血培养送检指征:当病人出现下列系统炎症反应的临床或实验室特征时应当采血送血培养:体温>38℃或<36℃;心率>90次/分钟;呼吸频率>20次/分钟或PaCO2<32mmHg;白细胞计数>12*109/L或<4*109/L。
二、采血时机
只要怀疑患者有菌血症、真菌血症的可能,在考虑使用抗菌药物之前,应立即采集血培养标本;若患者已行抗菌药物治疗,则应在下一次抗菌药物应用前采血培养。
说明:研究表明细菌通常在寒战和发烧前1小时入血,此时为采集血培养标本进行病原菌培养的最佳时机。考虑到操作的可行性和及早使用抗菌药物对患者有利,故做出以上建议。
二、血培养的次数
对怀疑菌血症的成人患者应当同时或短时间内从身体不同部位(如左右臂)同时采集2—3套血培养,至少做到“双瓶双侧”。
婴幼儿患者,推荐同时采集2次(不同部位)血培养标本。
说明:一个需氧瓶和一个厌氧瓶为1套血培养。“双瓶双侧”即在身体两侧各采集一套血培养。一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单个血培养。
研究证明血培养只做l套的检出率为为65%,做2套和3套的检出率分别为80%和90%。单瓶的血培养检出率不高,而且结果很难做出临床解释。
在采取血培养后的2至5天内,无需重复采集血培养,因为抗菌治疗的2至5天内,血液中的细菌不会立即消失。
一般来说菌血症(真菌血症)患者可通过临床表现来判断疗效,无需复查血培养或连续监测血培养。但有两个例外:第一是感染性细菌性心内膜炎病人,对于他们的菌血症(或真菌血症)是否被清除可被用于评估和指导治疗;第二是与感染性细菌性心内膜炎无关的金黄色葡萄球菌菌血症,对其阳性血培养的48至96小时的追踪可以很好的预测复杂的金黄色葡萄球菌菌血症。
三、采血量
成年患者推荐的采血量为每套不少于10ml,每瓶不少于5ml,
婴幼儿患者推荐的采血量,每瓶不少于2ml(少于病人总血量的1%)。
说明:血标本采集的量是影响检出率的最重要的因素,成人血培养采血量在2-30m1之间,检出率与采血量成比例增长,每增加1ml的血液,病原菌的检出率就会相应增加;儿童患者因为血液中病原菌浓度较高,血培养采血量无需等同于成人。实验室必须按照血培养瓶厂家的建议,采集足够的血液标本。
如果实验室收到采血量不足的标本仍需进行培养,则需在报告单上注明:“送检血液标本量未达到要求,会影响结果的灵敏度”。实验室要监控血培养血液量是否符合要求,并及时反馈给临床,这是质量保证的一项重要指标。
四、血液标本在需氧瓶和厌氧瓶中的分配
推荐以一个需氧瓶和一个厌氧瓶为一套血培养,作为常规血培养的组合。当采血量不能满足推荐的采血量时,应首先满足需氧瓶的需要。
说明:采用一对(需氧瓶+厌氧瓶)组合比采用二个需氧瓶的组合可检出更多的葡萄球菌、肠杆菌科细菌和厌氧菌。
五、采血要求
皮肤消毒:推荐使用碘酊、次氯酸和洗必泰或碘伏作为皮肤消毒剂
说明:碘酊、次氯酸和洗必泰的消毒效果要优于碘伏;消毒剂要有足够的作用时间以保证消毒效果(碘酊作用30秒;碘伏作用1.5-2分钟);洗必泰的作用时间和碘酊一样,但没有过敏反应,因此在静脉穿刺完成后不必擦去,但不能用于小于2个月的婴儿。
采集部位
推荐从外周静脉采集血液标本。
说明:不建议采集:1,动脉血,因其诊断价值不大;2,静
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