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6)种公猪:表现为睾丸肿硬、萎缩、性能低或丧失,精子活力差等。 4、病理变化 新生仔猪和哺乳仔猪在自然感染和人工感染PRV时均表现出较为明显的眼观病变: 上呼吸道黏膜及扁桃体出血水肿,胃肠黏膜可见卡他性或出衄性炎症; 中枢神经系统症状明显时,脑膜充血、出血、水肿,脑脊髓液增多; 组织学病变主要是中枢神经系统的弥散性非化脓性脑膜脑炎及神经节炎,有明显的血管套及胶质细胞坏死。 在脑神经细胞内、鼻咽黏膜、脾及淋巴结的淋巴细胞内可见核内酸性包涵体。 仔猪人工感染PRV强毒后出现了特征性的扁桃体坏死,淋巴结轻度充血或周边出血,肝和脾的浆膜面下有时可见散在的黄白色疱疹样坏死灶,肾脏柔软肿胀,表面小点出血。 成年猪感染PRV发生了坏死性肠炎。 母猪感染PRV后可见轻微子宫内膜炎和坏死性胎盘炎,公猪可发生阴囊炎。 软脑膜充血,其下脑沟积有出血性水肿液 胃底区粘膜出血性卡他 伪狂犬患猪剖检淋巴结肿大 伪狂犬患猪剖检肺部病变 伪狂犬患猪剖检肝脏白色坏死点 肾上腺切面坏死点 肾上腺皮质及隋质部可见散发性的坏死点 3、伪狂犬病诊断 本病仅根据临床症状及流行病学特点很难作出诊断,确诊需要借助实验室诊断技术。为了建立适合本病诊断和流行病学调查的方法,国内外许多学者进行了大量的研究。猪伪狂犬病检疫、诊断常用的方法有以下几种: 3.1 抗体检测 1) 中和试验:国际贸易制定方法 效价》1:2 即可判为感染阳性;但是,阴性血清未必是真阴性,因为孢疹病毒的免疫原性弱。 3、伪狂犬病诊断 2)ELISA(含鉴别诊断ELISA): 鉴别诊断标记:gE,gG,gC感染后9-14天可检测到gBgE抗体,均可持续5-6个月。母原抗体可维持到60-70日龄。个别场达到106天。 gE抗体可从乳汁获得,在血清中变为阳性。 3)乳胶凝集试验:可在现场操作 灭活病毒致敏乳胶而成为抗原,主要检测IgM抗体(早期抗体)。感染或免疫后40天之内为IgM阳性。 尚未研制成功检测gE抗体的乳胶凝集试验。 3、伪狂犬病诊断 3.2 病原分离鉴定 1)采集:活猪: 口咽液、鼻拭子。 病死猪:脑组织、扁桃体、肺脏;匀浆。 2)接种细胞:原代或传代猪肾细胞:PK-15,SK-5细胞。此外, BHK-21、IBRS-2细胞用于病毒的培养。 3) 病变细胞鉴定: 免疫荧光;PCR(gD、gE);(已知血清的)中和试验 3、伪狂犬病诊断 3.3 动物接种试验 1)本动物接种: 常用2周龄一下的抗体阴性仔猪 2)实验动物: 小鼠、家兔:奇痒(啃咬注射部位)。 3)人工感染时,注意生物安全,防止病原扩散 4、 预防 一旦受到伪狂犬病毒的攻击,会给猪场(尤其有母猪的猪场)带来严重的损失。可令大量母猪流产、死胎和仔猪死亡;疫情停止后猪群可长期带毒。因此,必需加强对伪狂犬病的预防和控制,降低伪狂犬病的发病率,降低减少经济损失。 4、1 疫苗免疫 4.1.1、伪狂犬病疫苗发展历程 1)灭活疫苗:在体外培养病毒强毒株,用甲醛等灭活病毒制成疫苗。 基因缺失灭活疫苗:伪狂犬病根除计划后期使用(法国与德国使用)。旨在减少环境中的病毒。 2)弱毒疫苗:通过非猪源细胞或鸡胚传代致弱,或在突变剂的作用下获得。 Bartha株、BC株、BUK株、MK-21株、MK-35株、ALFORT-26株及NIA-4株等。 3)基因缺失疫苗: -第1代基因缺失疫苗:TK基因缺失。 -第2代基因缺失疫苗:TK-/gG-、TK-/gE-、TK-/gC- -第3代基因缺失疫苗:多价基因工程疫苗 不同疫苗毒株的基因缺失背景 疫苗公司 毒株 缺失(失活)的基因 辉瑞 AuskipraBUK gE 梅里亚 Akipor 6-3 Bartha gE 勃林格 Bartha K-61 gE 海博莱 Bartha K-61 gE 英特威 Nobi-Vac Begonia TK,gE 富道 Suvaxun AujeszyNIA3-783 TK,gE 先灵葆雅 PrV Marker Gold S-PrV TK,RR
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