茶多酚對氧化应激损伤脑神经细胞的保护作用(2004_广东自然基金).docVIP

PAGE 顺 序 号 类 别 A 申报学科代 码 1 广东省自然科学基金 自由申请 项目 重　　点 项 目 名 称： 茶多酚对氧化应激损伤脑神经细胞的保护作用 及机理研究 申 请 者： 所 在 单 位： 邮 政 编 码： 通 讯 地 址： 申请者电话： 传 真： 电 子 邮 件： 申 请 日 期： 2004-3-16 广 东 省 自 然 科 学 基 金 管 理 委 员 会 二○○一 PAGE 1 研 究 内 容 和 意 义 摘 要 氧化应激与许多疾病的发生有关。在脑神经退行性病变过程中，氧化应激导致细胞内钙稳态失调，能量代谢和信号传导障碍而发生和加重疾病。茶多酚（Tea Polyphenols,TP）是从绿茶中提取的的主要活性成分，具有明显的抗氧化应激作用。本项研究利用经典的氧化剂（如如β淀粉样蛋白，神经毒素1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶（MPTP），秋水仙碱等）和慢性应激等刺激，建立氧化应激整体和细胞模型，以动物学习记忆和性活动等行为指标，脑内氧化产物和抗氧化酶活性、脑细胞内钙离子浓度和细胞膜流动性等生化检测指标，细胞凋亡等细胞生物学检测指标，进行系统和比较全面的评价茶多酚抗氧化应激与减缓衰老，改善学习记忆功能，调整胞内钙离子平衡和膜流动性，减轻和降低脑细胞损伤的作用关系，为茶多酚用于防治脑神经退行性疾病奠定药理学基础。 主题词 （主题词应反映研究内容，主题词数量不多于三个，各主题词之间以逗号分隔） 氧化应激，脑神经细胞，茶多酚 二、立论依据 请按以下提纲填写： 1、研究意义（对基础研究，着重结合国际科学发展趋势，论述项目的科学意义；对应用基础研究，着重结合学科前沿、围绕国民经济和社会发展中的重要科技问题，论述其应用前景） 2、国内外研究现状 3、本项目的创新之处 4、主要参考文献及出处（格式：论文——作者．题目．刊名．年份．卷(期)．页码／专著——作者．书名．出版者．年份） 研究意义：氧化应激（oxidative stress）是指机体内氧自由基的产生与清除失去平衡，或外源性氧化剂的过量摄入导致活性氧（reactive oxygen species, ROS）在体内堆积引起细胞毒性[1]。自由基氧化应激而损伤生物分子包括蛋白质、DNA和脂质过氧化，已涉入人类一些疾病的病因学[2]。已发现由氧化应激而引起的疾病有：冠心病、心肌缺血再灌注和动脉粥样硬化；神经退行性病；老年性斑变及白内障；糖尿病性微血管疾患；其他如炎症等[3，4]。其中，实验研究和临床病理检查均发现与衰老相关的中枢神经系统退行性病变，如帕金森病、老年性痴呆及多发性硬化等，它们的发病机制均与氧自由基有一定的关系[5]。因脑组织的氧代谢率极高，富含多聚不饱和脂肪酸，抗氧化能力低及再生能力差等，与机体其它组织相比脑组织更易遭受氧自由基的损伤[6]。体内存在氧化防御系统包括SOD、GSH和抗氧化营养素等对抗氧化应激反应，从而两者形成平衡关系。一旦体内产生大量的自由基未能被抗氧化剂所清除，一些重要的酶的功能就会被破坏，导致氧化应激和抗氧化防御间平衡失调，引起细胞膜多价不饱和脂肪过氧化反应。氧化应激和钙稳态失调被认为是神经原损伤死亡的关键因素，它们是急性和慢性神经退行性疾病和细胞死亡的“最后共同通路”（final common pathways）。神经细胞死亡主要是不可控制的大量离子内流和细胞溶解，神经细胞凋亡主要是“死亡基因”表达增加所致。现以确定“死亡基因”的表达增加或大量离子内流入细胞，其元凶仍然是钙稳态失调和自由基生成过多。反过来，各种基因、环境因素会影响神经原的钙稳态和自由基代谢。当细胞内钙离子持续增加，并同时存在自由基时，会出现恶性前馈循环，即钙离子加速自由基生成，或反过来，自由基增加细胞内钙离子堆积[3]。如β淀粉样蛋白（Aβ）在脑内增多时，可刺激脑内胶质细胞释放TNF-α，并作用于TNF-α受体，产生大量氧自由基，促发细胞凋亡或神经退行性变。同时，Aβ促进Ca2+内流，胞内Ca2+增加，而活化calpain和caspases，促进tau蛋白磷酸化，出现神经纤维缠结、细胞凋亡或退行性变[7]。近年来研究认为线粒体在调控神经退行性病变过程中起关键作用。线粒体中的遗传基因突变、胞内钙超载、兴奋性氨基酸释放过量、自由基（包括NO）生成过多，均能引起线粒体能量代谢障碍，神经退行性病变的发生和恶化[3，8，9]。抗氧化剂具有防止脂质过氧化以及清除和/或抑制自由基的作用，从而保护细胞，尤其是脑神经细胞，免受氧化应激的损伤，防止神经退行性疾病的发生。目前，抗氧化剂有内源性和外源性之分，内源性有酶抗氧化剂（超氧化物歧化酶SOD， 谷胱甘肽过氧化物酶GSH