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- 2016-11-29 发布于湖南
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发酵工程概况及发展q趋势
——特点之三:工艺独特 √例如,我国的制曲酿酒工艺,先后利用两种不同的微生物进行酿酒,对于现代发酵技术采用混种发酵和序列发酵具有重大意义。 ——特点之四:经验丰富 √我国古老的发酵技术积累了丰富的经验,已在《齐民要术》(公元6世纪)和《天工开物》(1637年)等典籍中都有详细记载。 (二)纯培养技术的建立(1900~1940) ·1680年,荷兰人安东尼·列文虎克(Anthony Leeuwenhoek)首先发明了能放大200倍~300倍的显微镜,发现并证实了微生物的存在,揭开了人类认识微生物世界的序幕。 ·微生物的发现促进了对发酵原理的认识 ——19世纪之前,亚里斯多德的“自然发生学说”占据统治地位,认为:生命有机体可以从一些没有生命的东西中产生。 ——“发酵的生命理论” 的提出:19世纪中期(1861年)法国著名生物学家巴斯德(Louis Pasteur)利用著名的曲颈瓶实验(两个曲颈瓶中分别加入肉汁,一个曲颈瓶加热后不发酵,另一个曲颈瓶不加热则发酵)否定了“自然发生学说”,提出了发酵的基本原理:“生命体只能由生命体产生;发酵是通过微生物的代谢活动而进行的化学变化(即发酵的生命理论)”。 ——“发酵的酶学理论” 的提出:19世纪后期(1897年)法国的巴克纳(Eduard Buchner)为了把酵母菌提取液用于医学,利用石英砂将啤酒酵母磨碎,取出液汁,加入蔗糖防腐,意外发现酵母提取液产生发酵现象,从而提出了无细胞体系发酵的酶学理论(即发酵的酶学理论)。同时也导致了当代生物化学的诞生,使微生物学与生物化学有机结合在一起。 ·微生物的发现也促进了纯培养技术的建立 ——19世纪后期(1881年)德国医生柯赫(Robert Koch)首次采用固体培养基分离纯培养细菌获得成功。 ——几乎与此同时(1878年),丹麦人汉森(Hansen)在卡尔斯伯(Carlsberg)啤酒厂建立了啤酒酵母单细胞纯分离培养法,确立了“汉森稀释法”纯培养的原理,至今采用。 ·微生物纯培养技术的确立,开创了人为控制微生物发酵时代 ——发酵工程技术得到改进,发酵效率得到提高,生产过程中的腐败现象大大减少,厌气性发酵技术得以发展。 ——1900年~1940年期间,出现的发酵产品有:面包酵母、甘油、酒精、乳酸、丙酮-丁醇等厌氧发酵产品和柠檬酸和淀粉酶、蛋白酶等好氧发酵产品。 ——培养面包酵母:通过补料工艺和利用空气分布管将无菌空气通入培养液,提高了面包酵母的生产量。 ——丙酮-丁醇的厌氧发酵:Weizmann等人发明简便的密闭式发酵罐(低碳钢制成的具有半圆形的顶和底的圆筒形发酵罐),采用高压蒸汽进行灭菌,建立了真正的无杂菌发酵技术。使发酵工业逐渐加入到化学工业的行列。 ·微生物纯培养技术的建立是发酵工程技术发展的第一个转折时期。 ·该阶段的特点 ——生产过程简单; ——对发酵设备要求不高; ——生产规模不大; ——发酵产品的结构比原料简单; ——属于初级代谢产物。 (三)通气搅拌好气性发酵工程技术(又称深层通气培养技术)的建立(1940~1957) ·1929年,苏格兰细菌学家弗莱明(Fleming)首先发现了青霉素 。1943年美国和英国合作研制出青霉素液体深层通气发酵工艺,包括:5m3机械搅拌发酵罐;通入采用纤维过滤进行高效率除菌的无菌空气;通过搅拌使空气分布均匀;培养基的灭菌和无菌接种;使微生物培养和发酵过程中的温度、pH、通气量、培养物的供给严格控制;之后离心萃取,冷冻干燥。 ·通气搅拌好气性发酵工程技术的建立,标志着生物和化学工程相结合的生化工程的诞生,使发酵工程技术在微生物学、生物化学、生化工程三大学科基础上迅速形成了一个完整的体系。 ·不仅促进了抗生素发酵工业的兴起,而且使各种有机酸、酶制剂、维生素、激素等产品都可以利用液体深层通气培养技术进行大规模生产。 ·该时期的特点是:微生物发酵的代谢活动已经从分解代谢转变为合成代谢,已经超越了微生物正常代谢的框架。 ·通气搅拌好气性发酵工程技术的建立是发酵工程技术发展的第二个转折时期。 (四)代谢调控发酵工程技术的建立(1957~1960) ·随着20世纪50年代DNA双螺旋结构的发现和生化技术的进展,代谢调控发酵工程新技术应运而生。 ·代谢调控发酵工程技术是指以动态生物化学和微生物遗传学为基础,从DNA分子水平上,控制微生物的代谢途径,使之进行最合理的代谢,在人工控制的条件下,选择性的大量积累人们所需要的代谢产物的工程技术。 ·1957年,日本木下祝郎利用诱变育种技术选育出能够积累谷氨酸的营养缺陷型棒杆菌株,在谷氨酸发酵生产应用获得成功。 ·该技术已在一系列氨基酸发酵生产中得到广泛应用(至今已有22种氨基酸采用发酵法生产,其中18种直接发酵,4种酶法转化)。 ·该技术在核苷酸、有机酸、抗生素等次
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