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第三章菌种选育的理论与技术概要

* 第六节 原生质体融合技术 (一)原生质体融合技术简介 (二)原生质体融合技术的一般过程 (三)其它原生质体技术 * (一)原生质体融合技术简介 原生质体: 微生物或植物去除细胞壁后的结构。 原生质体的特性: 没有细胞壁;失去细胞刚性,呈球形;对渗透压敏感脆弱。 原生质体融合: 通过人为方法,使遗传性状不同的两细胞的原生质体发生融合,并产生重组子的过程。 * 原生质体融合技术的特点与实践意义 杂交频率高:霉菌、放线菌,10-3~10-4 ,酵母、细菌10-5~10-6 受接合型或致育性的限制较少:近亲,远亲均可进行; 遗传物质的传递更完整; 可以多株同时参与融合; 可以采用产量较高的菌株作融合亲株; 提高产量性状的潜力较大,可实现多基因重组; 有助于建立工业微生物的转化体系——原生原体转化。 * (二)原生质体融合技术的一般步骤 融合亲本的选择与标记; 原生质体的制备; 原生质体的融合; 原生质体的再生; 融合子的选择与鉴定; 目标菌株的筛选。 * 1. 亲本的选择与标记 亲本的选择: 具有优良性状; 具有一定遗传标记。 亲本标记: 营养缺陷型或抗药性等; 自然标记; 细胞质遗传标记:小菌落、Killer等; 生产性状本身。 * 2. 原生质体制备 1)原生质体制备是指以溶壁酶水解去除微生

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