2016第节色谱峰展宽的柱外因素.pptVIP

第二章 色谱法的基本术语及理论 主要内容 主要内容 柱外峰展宽又称柱外效应。实际上，在色谱系统中，除了柱内峰展宽外，在色谱柱外也存在峰展宽的因素。引起峰展宽的柱外因素为进样器、检测器和各种连接管中的死体积。 因此，色谱峰展宽的总方差等于柱内、柱外及其独立因素的方差和，即 σ2总 = σ2柱内 + σ2柱外 + σ2其他。 降低柱外效应的方法 若管内径减小，其长度可增加；内径增大，则长度要缩短。0.25mm内径连接管应保持在100mm左右或更短。若采用内径为0.5mm连接管，则长度应在10mm以下，因而在进样器和检测器之间不使用0.5mm的连接管。但连接管内径减小，管内压力降较大，会使泵压上升。 降低柱外效应的方法 一般检测池内色谱峰展宽小于总的色谱峰展宽的10%时，则要求检测池体积小于14μl，一般为5 ~ 8μl。 降低柱外效应的方法 进样有时会是峰展宽的主要原因，这取决于进样体积和进样方式。进样体积越大，柱外效应越大 进样方式一般有阀进样与注射进样两种，阀进样允许进样体积大，注射进样允许进样体积小。 另外，进样体积还与溶质 k 值有关，溶质 k 值越大，允许进样的体积越大。 对于气相而言，由于色谱柱体积占色谱系统总体积的比例很大，柱外效应比较小。而高效液相色谱由于色谱柱体积较小，且溶质在液相中扩散系数很低，柱外效应对于色谱峰展宽成为不可忽略的因素，使用细内径色谱柱，考虑柱外效