营养缺陷菌株筛选.pptVIP

* 2 筛选策略 （1） 基本概念 ?? ?营养缺陷型 (auxotroph) 某一野生型菌株由于发生基因突变而丧失合成一种或几种生长因子的能力，因而无法在基本培养基上正常生长繁殖的变异类型。 ?? ?野生型（ wild type ）：从自然界分离到的任何微生物在其发生营养缺陷型突变前的原始菌株。 ?? ?原养型 (prototroph) ：一般指营养缺陷型突变株经回变或重组后产生的菌株，其营养要求在表型上与野生型相同。 ?? ?基本培养基 (MM) 能够满足野生型菌株生长最低限度需要的培养基。 ?? ?补充培养基 (SM) 凡能满足相应的营养缺陷型生长需要的培养基。在 MM 中加蛋白胨（多种氨基酸 ) 便可以用来培养各种氨基酸的缺陷型；加入酵母浸膏 ( 其中含有多种 B 族维生素和核苷酸 ) 便可以培养不同的维生素、嘌呤和嘧啶缺陷型。 ?? ?完全培养基 (CM) 凡能满足一切营养缺陷型生长需要的培养基。 营养缺陷性突变株 与营养要求有关的三类遗传型 2）营养缺陷型的筛选办法 诱变剂处理 淘汰野生型 检出缺陷型 夹层培养法 限量补充培养法 逐个检出法 影印接种法 鉴定缺陷型 菌丝过滤法 抗生素法 淘汰野生型：在诱变后的存活个体中，营养缺陷型的比例较低（百分之几～千分之几）。需选用适当的方法淘汰为数众多的野生型菌株，达到“浓缩”极少数营养缺陷型的目的。 过滤法是使能