(生物分析法)分子杂交.ppt

三 Western 印迹法(Western bloting) 检测蛋白质，即将电泳分离的非标记蛋白质转移到固相载体上，用特异的抗体对蛋白质进行鉴定及定量的方法 主要步骤： 蛋白质样品的制备 SDS-聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳 蛋白质的电转移：NC膜 靶蛋白的免疫学检测 靶蛋白于第一抗体（一抗）反应 与标记的第二抗体（酶标，二抗）反应 显色反应：酶促反应 转移与印迹 双抗体检测 膜固定蛋白 第一抗体 第二抗体 显色底物 有色（发光）产物 三种分子杂交技术的比较 Southern Northern Western 一、 分子杂交简介 二、核酸分子杂交技术 三、蛋白杂交技术 四、生物芯片技术 第三节 分子杂交与印迹技术 （一）生物芯片简介 1 概念 采用光导原位合成或微量点样等方法，将大量生物大分子有序地固化于支持物的表面，组成密集二维分子排列，然后与已标记的待测生物样品中靶分子杂交，通过特定的仪器对杂交信号的强度进行检测分析，从而判断样品中靶分子的数量。 2 芯片发展历史 Southern Northern Blot Dot Blot Macroarray Microarray 3 芯片种类 按固定分子： 基因芯片(Gene Chip) 蛋白质芯片(Protein Chip) 细胞（组织）芯片（C