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中药指纹图谱的建立方法及其应用进展 【摘 要】中药是中华民族的精髓，是中华民族五千年历史的结晶，中药的现代化成为中药走出国门更上一个新台阶的必要手段，因此药材、中成药的质量标准成为医药研究的一个重要课题。中药的指纹图谱作为一种非常先进并且切实可行有效手段，在中药质量、中药制剂及其中间体质量控制等方面得到了广泛的应用，已成为国际公认的控制中药质量非常有效的方法。本文就中药指纹图谱的方法及应用进展进行了综述。 【关键词】中药 中药制剂 指纹图谱 【中图分类号】G642 【文献标识码】A 【文章编号】1674-4810（2015）15-0117-03 　　一 指纹图谱在中药中重要性 　　中药样本经过现代分析技术手段可得到中药各组成部分的中药群体图谱或图像特征。主要用高效液相、气相、紫外、红外、计算机图像分析、扫描电子显微镜、核磁共振、分子生物学技术、同功酶分析法、电泳技术、X射线衍射技术、聚类分析技术等现代分析测试手段，呈现比较完整的中药的组成与含量及化学特定结构组成的图谱。中药图谱的特征是它并不要求呈现出每一个组分的化学结构，同时对每一个组成部分的精确定量也要求不高，但为保证中药的有效性，图谱信息必须尽可能清晰、丰富，并一定要具备“指纹”特征，保证了中药的有效性、安全性、可控性、一致性与稳定性。因此，为了对中药质量进行有效控制及药效研究及推广，推行现代化的中药指纹图谱十分必要。 　　二 中药指纹图谱的建立方法 　　1.TLC（薄层色谱）层析法 　　因具有容易操作、设备简单、结果呈现直观，分析速度较快等特点而得到广泛的应用。同时因薄层色谱分析发展较早、应用广泛而作为最主要的鉴别方法被多国植物药典收载（收录）。在2000年版《中国药典》收录的1000余种中药鉴别方法中，指纹图谱法作鉴别的种类有600多种，由此可见指纹图谱层析法应用之广泛、实用性之大。同其他鉴别方法一样，虽然指纹图谱同时能鉴别多个样品，但也有着自己的低效能、低重现性、低灵敏度等缺点，所以如果成分复杂的中药，是很难用指纹图谱来鉴别，并对中药和制剂提出有效的质量评价。 　　2.HPLC（高效液相色谱）法 　　相较TLC（薄层色谱），高效液相色谱法有着高分离效能、重现性好的特点。根据样品的不同和实际需要，高效液相色谱法还可以连同其他的检测器来分析各种类型的样品。HPLC与质谱分析以（MS）联用，在对中药分析时，不仅可快速得到中药图谱的指纹信息，还可同时得到色谱峰的结构信息，因此，HPLC与MS联用，成为得到中药指纹图谱的主导方法。采用1.7um粒填料的超高效液相色谱技术（UPLC）借助于HPLC的理论及原理，在分析时的通量、灵敏度及色谱峰容量等方面有着非常大的优势，是对天然产物及其代谢产物分离分析的有效方法，给中药指纹图谱研究提供了新方向和平台。 　　3.气相色谱法 　　气相色谱由于其对挥发性成分的检测具有分离效率高、分析速度快、样品用量少、检测灵敏度高和应用范围广的特点，常用于有挥发性的中药的成分检测分析，同时也用于在中药经衍生化反应后分析其成分中的糖、生物碱、脂肪、内脂、酚类等物质。近年来，为获得样品的全信息特征，多维检测技术的联用越来越受到中药分析的重视。 　　4.毛细管电泳（capillary electrophoresis，CE）法 　　毛细管电泳法因具有较少的进样量，高灵敏度、高柱效、满意的分析速度等优点而得到广泛的应用。毛细管电泳法是以毛细管为分离通道，依据进量样品中各组分之间有着淌度和分配行为上的不同，以高压直流电场为驱动力而实现分离析方法，对中药中复杂的成分可实现高效快速分离。毛细管电泳法理论体系逐渐成熟后，得到了迅速的发展，到目前为止毛细管电泳法已有多种分离模式，如处理尽量降低电渗流的毛细管区带电泳法、在缓冲液中加入离子型表面活性剂的胶束电动毛细管色谱、含色谱固定相的毛细管为分离柱的毛细管电色谱等，都可对动植物类中药成分进行高速有效的分离分析，在中药指纹图谱研究方面提供了更为广阔的前景及方法。 　　5.高速逆流色谱法（HSCCC） 　　高速逆流色谱法起源于1982年，是连续高效的液―液分配色谱技术，和上述色谱分离技术不同，它不需要任何固态载体，它保证了不和样品发生污染、失去活性，因而在分析分离中得到的结果重现性较好。高速逆流色谱法是根据动态液―液分配原理为基础的一类分离分析方法，区别于其他高效液相色谱分离法，有着样品前处理非常简单的极大优势。该方法具有分析纯度高、操作简单等优点，也存在分离时间过长、连接处容易出现渗漏等缺点。 　　6.X射线衍射法 　　区别于上述分析分离方法，X射线衍射法是依据光衍射原理的分析法。通过电子对X射线的散射产生衍射现象时，获得的电子密度的分布情况等信息而产生的衍射图谱。目前为止，