微生物代谢控制发酵(绪论,第一章)幻灯片.ppt

* * * * * * * 1、α-淀粉酶 是淀粉内切酶，作用于淀粉分子内部的任意的α-1，4 糖苷键。能以一种无规则的方式水解直链淀粉内部的键。如果是支链底物，则水解产物中含有支链和非支链的寡聚糖类的混合物。其中存在α-1，6糖苷键。 α-淀粉酶是一种需钙的金属酶，它以酶蛋白与钙离子结合而表现活性。故螯合剂EDTA等可抑制此酶。 * β-淀粉酶属巯基酶，氧化巯基的试剂可抑制它。 * Resources and energy source. ① 淀粉 是植物中养分的储存形式 淀粉颗粒 ② 糖原 是动物体内葡萄糖的储存形式 是淀粉内切酶，作用于淀粉分子内部的任意的α-1，4 糖苷键。 极限糊精是指淀粉酶不能再分解的支链淀粉残基。 α-极限糊精是指含α-1，6糖苷键由3个以上葡萄糖基构成的极限糊精。 （一）淀粉的水解 1、α-淀粉酶 直链淀粉 葡萄糖+麦芽糖+麦芽三糖+低聚糖的混合物 支链淀粉 葡萄糖+麦芽糖+麦芽三糖+ α-极限糊精 2、β-淀粉酶 是淀粉外切酶，水解α-1，4糖苷键，从淀粉分子外即非还原端开始，每间隔一个糖苷键进行水解，每次水解出一个麦芽糖分子。 直链淀粉 麦芽糖 支链淀粉 麦芽糖+β-极限糊精 β-极限糊精是指β-淀粉酶作用到离分支点2-3个葡萄糖基为止的剩余部分。 两种淀粉酶降解的终产物主要是麦芽糖 两种淀粉酶性质的比较 α-淀粉酶 不耐酸，pH3时失活 耐高温，70?C时15分钟仍保持活性 广泛分布于动植物和微生物中。 ?-淀粉酶 耐酸，pH3时仍保持活性 不耐高温，70?C15分钟失活 主要存在植物体中 α-淀粉酶及β-淀粉酶水解支链淀粉的示意图 α-淀粉酶 ?-淀粉酶 3、R-酶(脱支酶） 水解α-1，6糖苷键，将α及β-淀粉酶作用支链淀粉最后留下的极限糊精的分支点水解，产生短的只含α-1，4-糖苷键的糊精，使之可进一步被淀粉酶降解。 不能直接水解支链淀粉内部的α-1，6糖苷键。 4、麦芽糖酶 催化麦芽糖水解为葡萄糖，是淀粉水解的最后一步。 淀粉的彻底水解需要上述水解酶的共同作用，其最终产物是葡萄糖 （二）淀粉的磷酸解 1、磷酸化酶 催化淀粉非还原末端的葡萄糖残基转移给P，生成G-1-P,同时产生一个新的非还原末端，重复上述过程。 直链淀粉 G-1-P 支链淀粉 G-1-P + 磷酸化酶极限糊精 磷酸化酶不能将支链淀粉完全降解，只能降解到距分支点4个葡萄糖残基为止，留下一个大而有分支的多糖链，称为磷酸化酶极限糊精。 淀粉（或糖原）降解 1. 到分枝前4个G时，淀粉磷酸化酶停止降解 2.由转移酶切下前3个G，转移到另一个链上 3.脱支酶水解α-1，6糖苷键形成直链淀粉。脱下的Z是一个游离葡萄糖 4.最后由磷酸化酶降解形成G-1-P G—1—P 脱支酶 磷酸化酶 β-1,4-糖苷键 合成代谢举例——蛋白质 二、微生物代谢的特点 生物反应都在温和的条件下进行，大多为酶所催化； 反应具有顺序性； 具有灵敏的自动调节机制。 微生物的生长 生长 曲线 时间 调整期 对数期 稳定期 衰亡期 菌体 数目 代谢 特点 时间 细菌数目的对数 增长不明显 快速增长 活菌数目达到最大（K值） 活菌数目急剧减少 代谢活跃体积增大大量合成初级代谢产物 细胞分裂速率最快个体形态、生理特征较稳定 繁殖速率等于死亡速率细胞内大量积累次级代谢产物，某些细菌可形成芽孢 繁殖速率小于死亡速率菌体出现多种形态（畸形），细胞解体、释放代谢产物 微生物的生长 生长 曲线 时间 调整期 对数期 稳定期 衰亡期 成因 应用及其他 时间 细菌数目的对数 适应新环境 适应了环境后，条件适宜、营养物质充足等 营养物质消耗、有毒代谢产物积累、PH值的变化，种内斗争加剧 生存条件极度恶化，有毒代谢产物积累过，生存斗争最剧烈 长短与菌种、培养条件有关 可作为菌种也可作科研材料 制取代谢产物特别是次级产物 分子水平调控 Renewable raw materials Biofuels Biomaterials Chemicals Cell Factory 细胞水平调控 营养物质、辅助因子、膜的通透性、生长特性 反应器水平调控 代谢控制发酵理论的发展 1956年，谷氨酸发酵成功后，对生产菌株本身的研究逐渐深入，开始形成了代谢控制发酵技术。 代谢控制发酵理论使发酵由野生型菌株的发酵向高度人为控制的发酵转移，由依赖于微生物分解代谢的发酵向依赖于合成代谢（产物大量积累）的发酵转移。 从随机诱变盲目地挑选高产