03 第三章 核酸的结构与功能课件.pptVIP

* * * * 生物化学 护理学专业本科教材 帽子结构 生物化学 护理学专业本科教材 mRNA核内向胞质的转位 mRNA的稳定性维系 翻译起始的调控 帽子结构和多聚A尾的功能 生物化学 护理学专业本科教材 mRNA的功能 作为翻译的模板来指导蛋白质的生物合成 DNA mRNA 蛋白 转录 翻译 原核细胞 细胞质 细胞核 DNA 内含子 外显子 转录 转录后剪接 转运 mRNA hnRNA 翻译 蛋白 真核细胞 生物化学 护理学专业本科教材 tRNA的一级结构特点 含 10 % ~20% 稀有碱基，如 DHU 3′末端为 — CCA-OH 5′末端大多数为G 具有 T?C 二、转运RNA的 2N,2N二甲基鸟嘌呤 N6-异戊烯腺嘌呤 双氢尿嘧啶 4-巯尿嘧啶 稀有碱基 生物化学 护理学专业本科教材 tRNA的二级结构 ——三叶草形 氨基酸臂 DHU环 反密码环 额外环 TΨC环 氨基酸臂 额外环 生物化学 护理学专业本科教材 tRNA的三级结构 —— 倒L形 tRNA的功能 活化、搬运氨基酸到核糖体，参与蛋白质的翻译 生物化学 护理学专业本科教材 rRNA的结构 三、核糖体RNA rRNA的功能 参与组成核糖体，作为蛋白质生物合成的场所。 生物化学 护理学专业本科教材 核糖体的组成 原核生物（以大肠杆菌为例） 真核生物（以小鼠肝为例） 小亚基 30S 40S rRNA 16S 1542个核苷酸 18S 1874个核苷酸 蛋白质 21种 占总重量的40% 33种 占总重量的50% 大亚基 50S 60S rRNA 23S 5S 2940个核苷酸 120个核苷酸 28S 5.85S 5S 4718个核苷酸 160个核苷酸 120个核苷酸 蛋白质 31种 占总重量的30% 49种 占总重量的35% 生物化学 护理学专业本科教材 四 、其他RNA 除了上述三种RNA外，细胞的不同部位存在的许多其他种类的小分子RNA，统称为非mRNA小RNA(small non-messenger RNAs, snmRNAs) snmRNAs 生物化学 护理学专业本科教材 snmRNAs的种类 核内小RNA 核仁小RNA 胞质小RNA 催化性小RNA 小片段干涉 RNA snmRNAs的功能 参与hnRNA和rRNA的加工和转运 生物化学 护理学专业本科教材 RNA组学是研究细胞中全部RNA基因和RNA的分子结构和功能 RNA组学 生物化学 护理学专业本科教材 核 酸 的 理 化 性 质 The Physical and Chemical Characters of Nucleic Acid 第 五 节 生物化学 护理学专业本科教材 一、核酸的一般理化性质 生物化学 护理学专业本科教材 1. DNA或RNA的定量 A260=1.0相当于 50μg/ml双链DNA 40μg/ml单链DNA（或RNA） 20μg/ml寡核苷酸 2.判断核酸样品的纯度 DNA纯品: A260/A280 = 1.8 RNA纯品: A260/A280 = 2.0 A260的应用 生物化学 护理学专业本科教材 二、DNA的变性、复性 定义：在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程。 方法：过量酸，碱，加热，变性试剂如尿素、 酰胺以及某些有机溶剂如乙醇、丙酮等。 1. DNA的变性(denaturation) 生物化学 护理学专业本科教材 变性后其他理化性质变化： A260增高 黏度下降 比旋度下降 浮力密度升高 酸碱滴定曲线改变 生物活性丧失 生物化学 护理学专业本科教材 DNA变性的本质是双链间氢键的断裂 生物化学 护理学专业本科教材 变性引起紫外吸收值的改变 DNA的紫外吸收光谱 增色效应：DNA变性时其溶液A260增高的现象 生物化学 护理学专业本科教材 热变性 解链曲线：如果在连续加热DNA的过程中以温度对A260值作图，所得的曲线称为解链曲线 生物化学 护理学专业本科教材 Tm：DNA分子达到50%解链时的温度称为解链温度，又称熔解温度(melting temperature, Tm)；其大小与G+C含量成正比。 生物化学 护理学专业本科教材 2. DNA的复性 DNA复性(renaturation)的定义 在适当条件下，变性DNA的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象，这一现象称为复性 减色效应 DNA复性时，其溶液A260降低 热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程称为退火(annealing) 生物化学 护理学专业本科教材 核酸分子杂交(hybridization) 在核酸变性后的复性过程中，具有一定互