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第 二章微生物的营养 有机物分析 无机物分析 各种微生物生长的最低aw值 在高渗溶液中,细胞的水分外渗,造成质壁分离;而在低渗溶液中,细胞吸水膨胀,引起细胞破裂。 膜的组成对扩散的影响 胆固醇的含量:胆固醇使得膜变得僵硬,膜的渗透性减小 脂肪酸的组成:不饱和度增加,链的长度减少,膜的通透性增加。顺式结构比反式结构的通透性好。 环境条件对膜渗透性的影响 温度:温度升高,膜的有序性被破坏,渗透性增强 (heat shock for transformation) 乙醇等脂溶性物质:这些物质将增加膜的通透性,有利于物质的扩散 五、膜泡运输(membrane vesicle transport) 膜泡运输主要存在于原生动物中,特别是变形虫(amoeba), 为这类微生物的一种营养物质的运输方式。 外排作用示意图 大分子营养物通常水解后,才可被吸收加以利用。而这些水解酶均为蛋白质大分子,它们必须通过一定的机制才能向胞外分泌。 其它一些大分子物如毒素的分泌、细胞膜和细胞壁上的蛋白质结构成分的定位等也都需要进行蛋白质的跨膜运输。 二、大分子营养物质的运输 (1)蛋白质的转运机制 在大肠杆菌:Sec (Sec machinery)转运系统和Tat (twin-arginine translocation)转运系统。 共性: 1)蛋白质前体上均在N-端有介导转运的信号肽,信号肽均由3部分形成,信号肽在蛋白质穿越细胞内膜时被信号肽酶切除。 2)蛋白质的转运都需要消耗能量,Sec转运系统的能源来自于ATP的水解,在不同的阶段还需要质子梯度提供能量。而Tat转运系统的能量来自于质子梯度。 N区(带正电荷) C区(信号肽酶切点) H区(疏水性) 差异性: Sec转运系统转运的蛋白质以松散的线状形式转运,而Tat转运系统以折叠形式转运。 Tat信号肽通常比Sec信号肽长,含有双精氨酸保守序列核心S/T-R-R-x-F-L-K 。 丝/苏-精-精-N-苯丙氨酸-亮-赖 肠杆菌素是由产气杆菌、大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌等产生的。分子上的3个邻苯二酚基的6个酚氧原子与Fe(III)形成八面体型配合物。 通道蛋白与促进扩散 和载体蛋白显著的差异在于通道蛋白并不与底物分子结合,通道蛋白主要以α-螺旋或β-折叠两种类型的跨膜蛋白存在,在横跨细胞膜形成亲水性孔洞或通道,使亲水性物质顺浓度梯度进入细胞或流出细胞,并通过打开或关闭通道来调节物质的进出。 通道蛋白普遍存在于细胞膜中,目前已发现有50多种, 如大肠杆菌中的甘油运输体(glycerol transporter)(GlpF),水特异的亲水性通道(aquaporin-Z)、动力敏感离子通道(mechanosensitive)(MscL)和电位敏感离子通道(voltage-sensitive ion channel)等。 通道载体(通道蛋白)与促进扩散 短杆菌肽构成的离子通道 甘油运输体(GlpF) GlpF是存在于大肠杆菌内膜上的一个α-型通道,甘油以促进扩散的方式通过通道进入细胞,但这一通道专一性不强,除可运输甘油外,还可以运输多羟基醇类和其它一些小分子物质如脲,甘氨酸,但不 能运输带电分子如3-磷酸甘油醛和二羟丙酮。同样,酵母细胞的GlpF的专一性也不是很强,除甘油外还可以运输水和小的溶质分子。 水特异的亲水性通道(aquaporin-Z) 作为重要的生理分子,水除了通过被动扩散方式进出细胞外,在大肠杆菌中水还可通过对水特异的亲水性通道(aquaporin-Z)以促进扩散方式进出细胞,使细胞适应外环境渗透压的突发变化,维持细胞的稳定性。 3、主动运输 (active transport) 特点: 是微生物吸收营养的主要方式 可逆浓度梯度运输,耗能 需载体蛋白,有特异性 运输有机离子、无机离子、氨基酸、乳糖等糖类 需要特异性载体蛋白,需要能量来改变载体蛋白的构象 亲和力改变→蛋白构象改变→耗能 运输物质所需能量来源: (1)质子动力 (2)ATP和其他高能化合物 好氧型微生物直接利用呼吸能; 厌氧型微生物利用化学能(ATP); 光合微生物利用光能; 质子动力 ATP动力 主动运输(1)质子动力型 (1)单向传递 (uniport) (2)逆向传递 (antiport) (3)同向传递 (symport) Na+/糖 Na+,(H+)/脯氨酸a Na+, H+/谷氨酸a Na+/氨基酸 H+/磷酸根a H+/无机阴离子 H+/乳糖a H+/半乳糖a H2PO.4 :磷酸丙酮酸b H+/糖 H2PO.4 :3-磷酸甘油a H+/葡糖酸a H2PO.4 : 6-磷酸己糖a H+/琥珀酸a H2PO.4 : 有机阴离子 H+/丙酮酸a K+:CH3NH+ H+
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