第十一章核酸合成课件.ppt

目 录 DNA的生物合成 RNA的生物合成 主要内容： 1、DNA复制：DNA复制的半保留方式；DNA复制的起始点和方向；DNA复制的酶类和蛋白质；DNA复制的基本过程； 2、DNA的修复：DNA的损伤修复，突变； 3、RNA的生物合成：不对称转录；RNA聚合酶；转录过程；转录后加工过程； 4、RNA复制和逆转录：RNA复制；逆转录； 重点：1、DNA复制；2、转录； 难点：DNA复制和转录过程。 引 言 实验证明：DNA是生物遗传的主要物质基础，作为遗传信息的载体以特定的核苷酸排列顺序为遗传密码，通过复制传递给后代，使得后代保持亲代相同或相近的遗传性状，并通过DNA转录成RNA、翻译为蛋白质的形式表达出来。然而，某些生物RNA也可以作为遗传信息的携带者，如RNA病毒能自我复制，致病RNA病毒还可以通过逆转录方式把遗传信息传递给DNA。 中心法则 生物的遗传信息从 DNA传递给 mRNA的过程称为转录。根据 mRNA链上的遗传信息合成蛋 白质的过程，被称为翻译或 表达。1958年Crick将生物 遗传信息的这种传递方式称为中心法则。 DNA的生物合成有两条途径，DNA的自我复制和RNA的反转录（逆转录）。其中DNA的复制是DNA合成的主要途径。 11.1.1.1 DNA的半保留复制 1968年日本冈崎（R.Okazaki）提出DNA不连续复制模型，通过用3H-脱氧胸苷标记噬菌体T4感染的大肠杆菌实验，发现短时间内首先合成较短的DNA片段。 DNA聚合酶在大肠杆菌中发现5种DNA聚合酶，所以命名为DNA聚合酶Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ。 DNA聚合酶IV和V：1999年发现，当DNA严重损伤时，诱导产生。 ①DNA聚合酶Ⅰ 为单肽酶，呈球形。以四种dNTP为底物，在DNA模板的指令下，按碱基配对原则，把dNTP逐个加到引物的3’末端，形成二酯键，新合成的链按5’→3’方向延伸。 当错误的核苷酸参入正在合成的DNA链时，酶3’→5’的外切活性增大，可及时将其切除，保证复制过程的高保真度。 ②DNA聚合酶Ⅱ 为多亚基酶，活性比聚合酶Ⅰ低，仅为5%。 ③DNA聚合酶Ⅲ 为寡聚酶，由多种亚基组合而成，功能强。 4. DNA拓扑异构酶 又称旋转酶或松弛酶，在DNA复制、修复过程中都要先解开双链，提供单链模板。是催化DNA双螺旋解旋的酶。 5. DNA解螺旋酶 在DNA复制、修复过程中将埋藏在DNA超螺旋分子中的碱基对暴露出来作为模板，才能合成新链。可使碱基对之间的氢键断裂。 6. 单链结合蛋白（SSB） 结合在DNA单链区，保护DNA单链免遭核酸酶的降解，并保持伸展状态；其次能降低天然DNA的Tm，促进DNA解链。 11.1.1.4 DNA的复制过程 DNA的合成以四种dNTP（dATP、 dTTP、 dCTP、 dGTP）为底物，在DNA模板指令下，按碱基配对原则，由DNA聚合酶催化，向DNA的3’-OH端添加核苷酸，以5’ → 3’的方向合成与模板互补的新链。反应如下： DNA 复制过程可分为: 起始、延伸和终止三个阶段。 1 复制的起始 起始点（生长点、原点、复制子） 细胞内存在有识别起始点的蛋白质。原核细胞只有一个，而真核细胞有多个起始点。 反转录的简要过程表示如下： 　　反转录酶的作用是以dNTP为底物，以RNA为模板，tRNA(主要是色氨酸tRNA)为引物，在tRNA3’-OH末端上，按5′→3′方向，合成一条与RNA模板互补的DNA单链，这条DNA单链叫做互补DNA(complementary DNA, cDNA)，它与RNA模板形成RNA-DNA杂交体。随后又在反转录酶的作用下，水解掉RNA链，再以cDNA为模板合成第二条DNA链。至此，完成由RNA指导的DNA合成过程。 个别脱氧核糖核苷酸残基甚至片段DNA在构成、复制或表型功能上的异常变化，称为突变（mutation），也称为DNA损伤（DNA damage） 遗传物质结构改变引起遗传信息的改变。 11.1.3.1 突变的意义 （－）突变是进化、分化的分子基础 自发突变或自然突变 （二）突变导致基因型改变 多态性：个体之间的基因型差别。 （三）突变导致死亡 突变发生在对生命过程至关重要的基因上，可导致个体、细胞的死亡。 （四）突变是某些疾病的发病基础 有害的突变 11.1.3.2 引发突变的因素 （一）自发突变 （二）诱发突变 1