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VEGF在多囊肾发生发展中的水平变化及机制探讨 　　[摘 要] 目的：探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）在多囊肾（Polycystic kidney disease，PKD）发生发展中的水平变化及机制，为PKD的临床治疗提供新的思路。方法：以我院2012年8月―2015年8月收治的118例PKD患者为研究对象，纳入观察组，并按照其肾小球滤过率（Glomerular filtration rate，GFR）状态，将GFR≥25 mL/min患者纳入高滤过率组，将GFR25 mL/min患者纳入低滤过率组，此外，选取同期50例肾透明细胞癌患者，纳入对照组。比较观察组患者肾壁组织、对照组患者癌旁正常肾组织VEGF表达水平，并分析VEGF与观察组患者GFR的关系。结果：观察组VEGF表达等级高于对照组，其VEGF阳性率为83.05%，亦高于对照组的54.00%，差异有统计学意义（P0.05）。高滤过组VEGF表达等级高于对照组，其VEGF阳性率为97.96%，亦高于对照组的72.46%，差异有统计学意义（P0.05）。结论：VEGF在PKD的发生过程中扮演了重要角色，随着肾纤维化严重程度的逐渐增加，PKD肾脏组织VEGF表达逐渐下降，PKD早期实施VEGF抑制治疗、PKD中晚期实施VEGF补充治疗有望成为改善PKD患者预后质量的新途径。 　　[关键词] 血管内皮生长因子；多囊肾；肾小球滤过率；机制 　　中图分类号：R692 文献标识码：B 文章编号：2095-5200（2016）05-020-03 　　DOI：10.11876/mimt201605008 　　多囊肾（Polycystic kidney disease，PKD）是一种常染色体遗传病，患者以肾脏皮质及髓质出现大量囊肿为主要病理生理改变，囊肿对肾组织的持续挤压可导致肾实质损害，并引发血尿、蛋白尿等临床症状，部分患者可因毒素积累发生尿毒症，生存质量受到严重威胁[1]。目前临床对PKD的发病机制尚无明确阐释，多数学者认为，囊肿衬里上皮细胞过度增殖、囊肿周围新生血管生成是导致PKD发生发展的主要原因[2]。研究发现，血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）可参与小鼠PKD模型新生血管生成环节，导致囊肿增多、增大及肾脏组织纤维化[3]，但关于VEGF在PKD患者发病机制中作用研究较为缺乏。本研究探讨VEGF在PKD发生发展中的水平变化及机制，希望为PKD发病机制及治疗方案的指导提供新的思路。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　以我院2012年8月―2015年8月收治的118例PKD患者为研究对象，均接受去顶减压术治疗，并经术后病理组织学检查确诊PKD[4]，排除合并肾脏严重感染、自发性出血、难治性高热、恶性肿瘤者，纳入观察组，并按照其肾小球滤过率（Glomerular filtration rate，GFR）状态，将GFR≥25 mL/min患者纳入高滤过率组，将GFR25 mL/min患者纳入低滤过率组[5]，此外，选取同期50例肾透明细胞癌患者，均经术后病理组织学检查明确诊断且癌旁组织为正常肾组织，纳入对照组。观察组男79例，女39例，年龄32～51岁，平均年龄（40.85±5.42）岁；对照组男33例，女17例，年龄30～55岁，平均（41.07±6.38）岁。两组患者性别、年龄比较，差异无统计学意义，具有可比性。 　　1.2 研究方法 　　1.2.1 标本取材 观察组标本取自于术中新鲜多囊肾壁组织，对照组标本取自术中癌旁组织，标本自肾透明细胞癌边缘≥5 cm且病理组织学检查未见癌细胞。标本取出体内后立即以10%中性福尔马林固定，行乙醇和二甲苯脱水、透明，石蜡包埋，保存待测。 　　1.2.2 检测方法 使用免疫组化染色法检测待测标本VEGF表达情况，检测方法[6]：实施切片脱蜡、水化，以PBS冲洗后行抗原修复，而后置于3% H2O2去离子水中，室温孵育10 min，PBS冲洗并滴加适当比例稀释后一抗，置于恒温孵育箱内，37℃孵育1 h；PBS冲洗并滴加二抗，置于恒温孵育箱内，37℃孵育30 min。最后实施DAB显色、苏木素复染、梯度酒精脱水、二甲苯透明、树胶封片，以PBS代替一抗为阴性对照，实施结果判定。 　　1.2.3 结果判定 于光学显微镜（×400）下，采用半定量5分评分法，选取10个不重叠的视野，根据VEGF在标本内染色强弱深度及染色范围进行结果判定，判定标准[7]：染色强度：0分：无着色；1分：浅着色，视野内可见棕黄色片状染色；2分：深着色，视野内可见棕黄色大颗粒或棕黑色染色；染色范围：1分：棕黄