骨形态发生蛋白9的研究进展.docVIP

骨形态发生蛋白9的研究进展 　　摘要：骨形态发生蛋白9（BMP-9）是转化生长因子超家族的成员之一，已知BMP家族中成骨活性最强的成员；Smad蛋白在其信号传导中起重要作用；BMP-9腺病毒为载体表现出强大成骨能力；BMP-9还具有促进原始神经元乙酰胆碱的合成，调节造血干细胞，降低血糖等作用。 　　关键词：骨形态发生蛋白9；信号通路；成骨作用；腺病毒 　　骨形态发生蛋白（bone morphogenetic proteins，简称BMPs）是转化生长因子（transforming growth factor-β，TGF-β）超家族的成员之一，在人体内由肝脏合成并分泌，具有多种生物学功能，尤其是骨诱导能力，现已成为了医学界的研究热点，特别是为难以突破的骨缺损修复问题提供了新的治疗方法，现阶段BMP家族中的BMP-2和BMP-7以被成功应用到临床治疗中，并取得了良好的效果。BMP-9又称GDF2（growth differentiation factor 2），是已知BMP家族中成骨活性最强的成员，因其骨诱导活性不会受到免疫反应的较大抑制，故也是该家族中唯一能在有免疫能力的活体动物体内显著诱导骨形成的成员。目前研究已证实，动物模型中BMP-9可有效地修复骨缺损。现阶段BMP-9 的成骨机制、成骨作用、表达纯化方法、载体及支架材料的选择已经成为目前研究工作的热点和重点。 　　1基本特征 　　BMP9（也称GDF-2，growth differentiation factor 2）是BMPs 中的一种，主要由肝脏分泌并完成表达，其免疫原性较低，通常不会引起免疫排斥反应，只具有轻微的免疫刺激能力。BMP9从结构上看为高度保守的糖蛋白，对核酸酶以及胶原酶等大部分蛋白酶不敏感，只对胰蛋白酶和糜蛋白酶敏感。现已经证实BMP9具有诱导和维持胚胎神经元的类胆碱分化、调节葡萄糖和脂肪酸代谢、调节体内铁的动态平衡等多种重要功能，BMP-9通常会以前体和二聚体的形式存在，其在结构上不含有第7保守半胱氨酸这一特点与绝大多数TGF-β超家族成员相区别[1-2]。人BMP-9的基因位于染色体10q1 1.22，它的前体蛋白包含428个氨基酸残基，该氨基酸序列中有50%-55%与BMP-2，4，5，6，7，8相同，人与鼠的BMP-9有80%的同源性[3-4]。 　　2信号传导通路 　　2.1 Smad蛋白 现有的研究已经确认Smad蛋白在TGF-β超家族成员的信号转导中具有重要的作用。TGF-β超家族的二聚配体与细胞膜表面的Ⅱ和Ⅰ型丝氨酸 /苏氨酸激酶受体结合形成异四聚复合体。活化后的Ⅰ型受体使R-Smad磷酸化 ，磷酸化的R -Smad与Co-Smad形成异聚复合体，进入细胞核与其它转录协同子和抑制子共同调节靶基因的转录。且不同的Smad介导不同的TGF-β家族成员的信号转导。到目前为止，已经从哺乳动物体内分离和鉴定出8种Smad蛋白，按功能分为3类：即受体活化型（或称通路限制型）、共同通路型和抑制型。其中、受体活化型具有介导BMPs通路的作用；共同通路型通过与细胞核内的特异蛋白一起结合到细胞的DNA上调控靶基因的转录；抑制型通过与Ⅰ型受体结合而抑制BMPs配体的活性[5-7]。 　　2.2依赖 Smads 信号传导通路与非依赖Smads 信号传导通路 在BMPs信号传导通路的过程中，异源二聚体受体与BMPs配体结合后，Ⅱ型受体的转磷酸作用使Ⅰ型受体在丝氨酸/甘氨酸区被磷酸化，从而激活Ⅰ型受体，Smad 1、Smad 5、Smad 8 羧基端上的丝氨酸序列会在其丝氨酸激酶的作用下磷酸化从而将信号传入至细胞内。接下来两个或者两个受体调控的Smad蛋白分子与一个Smad 4会形成一个异源性三聚体或着形成一个异源二聚体进入到细胞核内，核转录因子与核内Smads蛋白的MH2区域进行结合，作用于目的基因[8-9]。 　　MAPK信号传导通路是目前研究最多的非依赖Smads 信号传导通路。MAPK是一种苏氨酸/丝氨酸蛋白激酶，主要有细胞外相关信号蛋白激酶（ERK），两个应激活性蛋白激酶（JNK），以及p38 MAPK三种类型[10]。它参与细胞的增殖分化、不同种细胞间的相互作用、细胞的恶变。Gresser WA等人的研究表明以上三种蛋白激酶都能提高成骨分化能力[11]。 　　2.3 BMP-9成骨信号传导通路 现有研究表明经典Wnt 信号通路、Hey1、碱性螺旋-环-螺旋蛋白和过氧化物酶增殖体活化受体2、激活素受体样激酶1 和2、胰岛素生长因子2 及类维生素A 等都与BMP-9的骨诱导过程有关。BMP-9在结构上有别于TGF-β超家族的其他成员，其型号传导通路也有所不同。KangQ等人研究表明，具有成骨作用的BMP-2/6/7，在受到骨形成的