第十四章脊椎动物体节的形成与分化.pptVIP

* * 授课教师：吴中华 授课专业：生物科学 二零一四年 第十四章 脊椎动物体节的形成与分化 第十四章 脊椎动物体节的形成与分化 脊椎动物神经胚期的胚胎中胚层可被分为5个区域： ①脊索中胚层-发育成为脊索。 ②轴旁中胚层 这一部分细胞迅速增殖，形成一对纵行的细胞索，随即形成一系列块状细胞团，称体节（somite）。体节左右成对，从头部向尾部依次形成。每一个体节单位又分化为3个区域，即生皮节、生肌节和生骨节，最终分别发育成为真皮、骨骼肌和中轴骨骼。 ③中间中胚层，发育形成泌尿生殖系统。 ④侧板中胚层，是中胚层最外侧的部分。侧板中胚层又分为靠内侧的脏壁中胚层和外侧（紧贴外胚层）的体壁中胚层，两者之间形成体腔。脏壁中胚层覆盖于原始消化管外面，将分化为消化和呼吸系统的肌组织、血管和结缔组织等。心脏起源于前部的脏壁中胚层。体壁中胚层将来形成体壁（包括肢体）的骨骼、肌肉、结缔组织等。在羊膜类胚胎中，侧板中胚层还参与胚外膜的形成。 ⑤头部间充质中胚层，将形成头面部的结缔组织和肌肉。 第一节 脊椎动物体节的形成 脊椎动物体节是由前体节中胚层（presomitic mesoderm, PSM）形成的，而在体节开始形成时，大部分的预定体节细胞尚没有产生，体节的形成是一个细胞增殖与分化周期性进行的过程。胚胎尾芽区的PSM细胞属于未分化细胞，细胞分裂旺盛。而随着PSM细胞的增殖，PSM前部的细胞会逐渐脱离尾芽区而形成上皮化的体节。 具有以下几个特征： ①脊椎动物体节是由前体节中胚层以“出芽”的方式从前到后依次形成的。 ②每一个体节形成的周期是固定不变的，就像有一个时钟在控制，称为分节钟( segmentation clock）。不同物种的体节数目和每一体节形成的周期有所不同。小鼠和人的体节发生周期分别为2h和8h。 ③分节过程与其他形态发生过程是密切协调进行的，体节形成的时间与位置受到严格的调控。每一体节在形成的同时已具备前-后区域的分化和确定的前-后轴特异性。 一、周期性表达基因 1997年, Pourquie? (Palmeirim et al. 1997)实验室发现c-hairy1基因在鸡胚前体节中胚层中周期性表达。c-hairy1最初在PSM的后部和尾芽区广泛表达，随着前部预定体节的成熟,c-hairy1的表达逐步向PSM前部推进并固定于新形成的体节的后半部分。其表达变化完成一个周期需要90 min，与其体节形成周期恰好一致。 Hairy1编码一个碱性HLH转录抑制因子，是Notch信号途径的靶基因之一。 在小鼠和斑马鱼中，许多Notch信号途径因子的突变都会导致体节发育异常，同时一些周期性表达基因的表达也被破坏，说明Notch信号很可能直接参与了体节的形成和周期性表达基因的表达调控。 二、周期性表达基因的转录调控 小鼠lfng基因启动子中负责其周期性表达的序列已被找到，其中含有一个CBF1/RBP-J( Notch信号的转录效应因子）的结合位点，表明它直接受到Notch信号的调控；同时还含有两个E-box（bHLH因子结合位点，图14.3）。 研究表明lfng, deltaC等基因的表达可能受到Notch信号的正调控和hes7或其他hairy相关bHLH因子的周期性负调控，从而使得这些基因呈现周期性表达的特点。 三、分节钟的分子机制：负反馈调节环路 2002年，Hirata等发现，在培养细胞中，经过血清刺激后，hes1 mRNA和蛋白都呈现周期性表达，其变化周期恰好为2h，这与小鼠体节形成的周期是一致的，说明两者可能具有相同的分子机制。 其中Hes1蛋白表达变化周期比起mRNA的变化周期滞后15min, hes1 mRNA和蛋白都具有一个很短的半寿期（约20 min) .Hes1蛋白通过泛素-蛋白酶体途径被降解。如果加入蛋白酶体抑制剂以阻断Hes1蛋白的降解，其mRNA的转录就会被持续抑制；相反地，在Hes1蛋白失活时，其mRNA的转录则持续被激活，说明Hes1蛋白可抑制其本身mRNA的转录，同时这一系统中hes1转录的激活因子是持续存在的而不是周期性表达的。 这一负反馈调节环路是hes1周期性表达的关键。在这一环路中，Hes1蛋白可抑制其mRNA的转录，但随着Hes1蛋白的迅速降解，其转录得以进行，从而开始下一个表达周期。这样，通过这一负反馈调节环路，hes1的表达被持续激活时就会自动呈现周期性表达的状态。 Wnt信号同样参与了分节的过程。Axin2是一个Wnt信号抑制因子，Aulehla等（2003）发现，Axin2在小鼠PSM中也存在周期性表达的现象，而其循环周期与Lfng表达周期的