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第三章微生物..docVIP

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第三章 病毒和亚病毒 随着有关病毒学知识的日益增多,新的病毒种类不断发现,现已把非细胞生物分成病毒和亚病毒。 (真)病毒:至少含核酸 非细胞生物 类病毒:只含具单独侵染性的RNA组分 亚病毒 拟病毒:只含不具单独侵染性的RNA组分 朊病毒:只含蛋白质一种组分 第一节 病毒 病毒定义:病毒(Virus)DNA或RNA的遗传因子,它们能以感染态和非感染态两种状态存在。 随着病毒学知识的日益增多,不同学者从不同角度对病毒的基本特性进行了概括,现将病毒区别于其他生物的主要特征归纳如下: ①形体极其微小,必须在电镜下才能观察,一般都具滤过性 ②没有细胞构造,故也称分子生物 ③每一种病毒只含一种核酸,不是DNA就是RNA ④宿主活细胞内营专性寄生,利用宿主细胞设备进行增殖, ⑤在离体条件下,能以无生命的化学大分子状态存在,并可形成结晶 ⑥对一般抗生素不敏感,但对干扰素敏感 一、病毒 形态构造和化学组成 (一)病毒的大小 研究表明,病毒比细菌小得多 ,但比多数蛋白质分子大,而且病毒大小相差很远。直径在10-300nm之间,通常在100nm左右。 (二)病毒的形态 1、典型病毒粒子的构造 病毒粒子(或称病毒颗粒)是指成熟的结构完整的单个病毒,病毒粒子的主要成分是核酸和蛋白质,核酸位于病毒粒子的中心,构成了它的核心或基因组,蛋白质包围在核结构和抗原成分,对核酸有保护作用,在电镜下可看到,衣壳的形态学亚单位是衣壳粒,有些病毒,核衣壳外还有由类脂或脂蛋白组成的包膜,有时,包膜上还长有刺突等附属物。 2、病毒粒子的对称体制   研究表明:由于衣壳粒排列组合的方式不同,使病毒粒子往往表现出来不同的构型和形状。病毒粒的对称体制有两种:螺旋对称和二十面体对称。螺旋对称能使核酸与Pr亚基间的接触更为紧密,廿面体对称有利于核酸以高度卷曲的形式包裹在小体积的衣壳中,另外一些结构复杂的病毒,其衣壳的特点无非是螺旋对称和廿面体对称相结合而已,故称复合对称。 (三)三类典型形态的病毒 1、螺旋对称的代表-烟草花叶病毒(TMV) TMV是发现最早、研究最深和了解最清楚的一种病毒衣壳粒和核酸呈螺旋对称形排列,其外形呈直杆状。 2、廿面体对称的代表-腺病毒(Adenovirus) 这是一种动物病毒,看起来象球形,经分辨率高的电镜观察实际是廿面体,于1953年首次从手术切除小儿扁桃体中分离到。目前已分离到近百种腺病毒。其宿主包括人和各种动物。 3、复合对称的代表-T偶数噬菌体 大肠杆菌的T偶数噬菌体共有三种,在自然界分布极广,它们是分子生物学研究中的极好材料,因此对它们了解极其深刻,尤其是T4早已有十分清晰的电镜照片和最完整的基因组图。 T4由头部、颈部和尾部三部分构成,由于头部呈廿面体对称尾部呈螺旋对称,故是一种复合对称结构。 尾管中空是头部核酸注入宿主细胞的通道。 T偶数噬菌体虽呈蝌蚪状,但吸附却是通过尾丝,尾丝吸附后,会使基板受到构型的刺激,接着尾鞘蛋白发生收缩,使尾管插入宿主细胞。 (四)病毒的化学组成 病毒的核酸 一种病毒的毒粒只含有一种核酸:DNA或是RNA。 病毒核酸种类很多,是病毒系统分类中最可靠的分子基础,主要有以下衡量指标: ①是DNARNA ②是单链还双链 ③呈线状还是环状 ④是闭环还是缺口环 ⑤基因组是单分子、双分子、三分子还是多分子 ⑥ 核酸的碱基(bbp)数,及核苷酸序列等。 动物病毒以线状的dsDNA和ssRNA为多;植物病毒以ssRNA为主;噬菌体以线状的dsDNA居多,目前真菌的病毒都属dsRNA。 病毒蛋白质 包括非结构蛋白和结构蛋白。 病毒结构蛋白的主要生理功能: 1)构成蛋白质外壳,2) 3)决定病毒的抗原性,能刺激机体产生相应的抗体; 4)T4噬 菌体的溶菌酶等),或参与病毒复制过程中所需要病毒 大分子的合成(如逆转录酶等); 二、病毒的种类及培养 1、病毒的种类 病毒几乎可以感染所有的细胞生物,并具有宿主特异性。 噬菌体(phage):原核生物的病毒 植物病毒(plant viruses) 动物病毒(animal viruses) 人类和脊椎动物病毒 昆虫病毒 2、病毒的培养和纯化 同微生物学其他学科分支一样,病毒学的进步完全得益于研究方法和技术手段的发展。 病毒的培养:二元培养物法 1)噬菌体的培养 噬菌斑:  在涂布有敏感宿主细胞的固体培养基表面,接种合适浓度的噬菌体,每一个噬菌体粒子由于先侵染和裂解一个细胞,然后以此为中心,再反复侵染和裂解周围大量的细胞,就会在菌苔上形成一个

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