5、菌株纯化与细菌生理生化实验例析.ppt

实 验 五 菌株纯化与细菌生理生化实验 目的要求 加深对微生物分布广泛性的认识。 平板菌落计数法。 从细菌培养物中纯化菌株。 掌握菌种保藏的准备工作。 细菌对大分子分解的检测方法。 实验材料 上次实验分离培养的微生物 肉膏蛋白胨固体培养基（现制） 灭菌的培养皿 酒精灯、接种针、试管、棉塞等 菌种：枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形杆菌。 检测用培养基：淀粉培养基、油脂培养基、蛋白胨水培养基、糖发酵培养基（现制） LB培养基：下次实验使用。 实验内容1：平板菌落计数 含菌样品的微生物经稀释分离培养后，每一个活菌细胞可以在平板上繁殖形成一个肉眼可见的菌落。故可根据平板上菌落的数目，推算出每克样品中所含的活菌总数。 一般由三个稀释度计算出的每克含菌样品中的总活菌数和同一稀释度出现的总活菌数均应很接近，不同稀释度平板上出现的菌落数应呈规律性地减少。如相差较大，表示操作不精确。通常以第二个稀释度的平板上出现50个左右菌落为好。 实验内容2：单菌落制备（细菌菌株划线纯化） 菌种保藏 试管斜面冰箱保藏 甘油管冷冻保藏（-20℃ or -80℃） 冷冻真空保藏 沙土管保藏 液氮保藏 … 实验内容3：细菌生理生化 细菌生理生化反应是菌种鉴定的重要依据 主要根据不同微生物对不同生物大分子分解利用能力、代谢途径、代谢产物不同，来达到菌种鉴定的目的 实验内容3：细菌