成分测定提取.docVIP

水分：常压干燥法； 灰分：灼烧法； 蛋白质：凯式定氮法； 脂肪：索式抽提法； 淀粉：酸水解法； b. 膳食纤维的测定方法 （1）中性洗涤剂法测定膳食纤维[38] 原理：样品经热的中性洗涤剂浸煮后，残渣用热蒸馏水充分洗涤，除去样品中的游离淀粉、蛋白质、矿物质，然后加入(－淀粉酶溶液以分解结合态淀粉，再用蒸馏水、丙酮洗涤，以除去残存的脂肪、色素等，残渣经烘干，即为中性洗涤纤维（不溶性膳食纤维）。 ①主要试剂的配制方法： 中性洗涤剂溶液： 1.将18.61g乙二胺四乙酸二钠和6.81g四硼酸钠（Na2B4O7·10H2O）用250mL水加热溶解。 2.另将30g十二烷基磺酸钠和10mL乙二醇独乙醚（2－ethoxy－ethanol）溶于200mL热水中，合并于A液中。 3.把4.56g磷酸氢二钠溶于150mL热水，并入A液中。 4.用磷酸调节pH至6.9～℃，使沉淀溶解。 (－淀粉酶溶液：取0.1mol/LNa2HPO4和0.1mol/LNa2H2PO4溶液各500mL，混匀，配成磷酸盐缓冲溶液。称取12.5mg的(－淀粉酶，用上述缓冲溶液溶解并稀释到250mL。 ②测定方法： 样品干燥，磨细过20-40目筛 ↓ 精确称取1.000g样品，（如果脂肪10%，用正丁烷或二乙醚抽提） ↓ 100mL中性洗涤剂，0.05g无水亚硫酸钠，数滴正辛醇 三角瓶中微沸，100℃，1h ↓ G2玻璃砂芯坩埚（恒重）过滤，轻轻抽滤，残渣用300mL热水（100℃）洗涤 ↓ 5mL(－淀粉酶溶液洗涤过滤 ↓ 加入20mLl(－淀粉酶溶液，37℃保温1h ↓ 500mL热水分数次洗涤去除酶液 ↓ 25mL丙酮洗涤滤渣 ↓ 110℃干燥过夜，恒重，称重 （2）可溶性膳食纤维的测定方法 精确称取1.000g的样品，25mL纯净水，加热至100℃，保温30min，过滤，滤液加入4倍体积的95％乙醇，冰箱放置24小时，取出3500rpm下离心20min，抽提物干燥，称重。 (3) 纤维素含量的测定方法：按GB/T2677.10-1995进行 第二章：原材料的预处理和成分分析 2.1 试验材料 2.1.1 原材料 苹果渣：提取果胶后的苹果渣，乾县海升果汁有限公司60目 34.8 60～40目 11.0% 40～20目 30.4% 20目 23.8% 2.1.2 药品与试剂 盐酸、CH3COOH、CH3Cl、(NH4)CO3 、NaClO2、 HAc、 NaBH4 、H2O2 、NaOH（粉末）、无水乙醇、中性蛋白酶、无水乙醚、浓硫酸、K2SO4、CuSO4、硼酸、正丁醇、甲基红——溴甲酚绿指示剂等 2.1.3 分析仪器与设备 电子天平JA5003 电热恒温干燥箱DG/20-002 水分快速测定仪Sh10A 微型高速万能试样粉碎机FW80 循环水多用真空泵SHB-3 旋转蒸发器RE—52A 新型定氮消化炉 KDN-08C 凯氏定氮蒸馏仪 KDN-08C 索氏提取器 酸度计 PHS-2C 电热恒温水浴锅 电子分析天平FA2004 真空干燥 紫外光谱 上海精密科学仪器厂 重庆实验设备厂 上海第二天平仪器厂 河北省黄骅市新兴电器厂 河南省巩义市英峪仪器厂 上海亚荣生化仪器厂 上海洪纪仪器有限公司 上海洪纪仪器有限公司 天津玻璃仪器厂 上海大中分析仪器厂 北京化玻联医疗器械有限公司 上海精密仪器厂 2.2 分析方法 2.2.1 常规化学成分的测定 1）、水分含量的测定：远红外干燥法水，使用水分快速测定仪测定。 2）、蛋白质含量的测定：凯氏定氮法 药品准备 称取0.5～2g固体样品或2～8g半固体样品，精确至0.001g，移入干燥的500mL定氮瓶中，加入0.5g硫酸铜，5g硫酸钾及20mL硫酸 消化 开始将消化炉温度调到220℃，待碳化完全再将温度调到420℃，消化至溶液澄清透明并微显蓝色 蒸馏 通过电磁泵往消化瓶中加入25mL2%硼酸溶液、5滴混合指示剂溶液、 70～80mL40%氢氧化钠和100mL水，调节好蒸馏装置，蒸馏6分钟， 约收集150mL馏出液 定氮 用已标定的HCl滴定所蒸馏出来的NH3 计算 计算公式： 式中： X——样品中粗蛋白质的含量，%； V1——样品消耗盐酸标准溶液的体积，mL； V2——试剂空白消耗盐酸标准溶液的体积，mL； N——盐酸标准溶液的当量浓度； 3）、 脂肪含量的测定：索氏抽提法 操作方法样品处理　　精密称取2～5g(可取测定水分后的样品)，全部移入滤纸筒内。 抽提　　将滤纸筒放入脂肪抽提器的抽提筒内，连接已干燥至恒量的接受瓶，由抽提器冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚至瓶内容积的2/3处，于水浴上加热，使乙醚或石油醚不断回流提取，一般抽提6～12h。 称量