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* 高三生物第一轮复习 专题1基因工程 第一讲DNA重组技术的基本工具 体验高考 1. (09浙江卷)下列关于基因工程的叙述,错误的是 A.目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物 B.限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶 C.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性 D.载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达 D 体验高考 2. (09安徽卷)将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因,再将该融合基因转入真核生物细胞内,表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是 A.追踪目的基因在细胞内的复制过程 B.追踪目的基因插入到染色体上的位置 C.追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布 D.追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构 C 一 基因工程的概念 操作环境: 操作水平: 目的: 定向改造生物的遗传性状,创造出更符合 人们需要的新的生物类型和生物产品 基因工程又名: 生物体外 DNA分子水平 DNA重组技术 (或基因拼接技术) 二 DNA重组技术的基本工具 ㈠限制性核酸内切酶:“分子手术刀” 1.主要来源: 原核生物 2.作用特点: ①一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列; SamⅠ EcoRⅠ GAATTCCTTAAG CCCGGGGGGCCC ②只能在特定的切点切割; G A A T T C C T T A A G C C C G G G G G G C C C 中轴线 二 DNA重组技术的基本工具 2.作用特点: ③切断磷酸二酯键 G P A P 二 DNA重组技术的基本工具 3.作用结果: SmaⅠ 平末端 平末端 二 DNA重组技术的基本工具 3.作用结果: EcoRⅠ 黏性末端 黏性末端 二 DNA重组技术的基本工具 ㈡DNA连接酶—— “分子缝合针” 二 DNA重组技术的基本工具 ㈡DNA连接酶—— “分子缝合针” 1.分类: ⑴E·coli DNA连接酶 ⑵T4 DNA连接酶 2.作用: 二 DNA重组技术的基本工具 ㈡DNA连接酶—— “分子缝合针” 可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来,即恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 E·coli DNA连接酶 或T4DNA连接酶 二 DNA重组技术的基本工具 ㈡DNA连接酶—— “分子缝合针” T4 DNA连接酶还可把平末端之间的缝隙 “缝合”起来,但效率较低 二 DNA重组技术的基本工具 ㈢基因进入受体细胞的载体 ——“分子运输车” 1.载体需要的条件: ⑴有1~多个限制酶切点 ⑵对受体细胞无害 ⑶能自我复制 ⑷有某些标记基因 二 DNA重组技术的基本工具 *
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