DNA合成与修复课件.ppt

第五章 DNA的复制和修复 一、DNA复制方式 二、参与DNA复制的因子 三、DNA复制过程 四、逆转录 五、DNA损伤的修复 DNA半保留复制的证据 二、 DNA复制的酶学 1.底物 dNTP(dATP,dGTP,dCTP,dTTP) 2.聚合酶 DNA聚合酶I 、II、III 3.模板　单链的DNA母链 4.引物　寡核苷酸引物（RNA) 5.其他酶和蛋白质因子 解链酶，解旋酶， 单链结合蛋白，连接酶　　 （一）DNA聚合酶的活性 5′至3′的聚合活性 5′→ 3′方向 核酸 外切酶活性 5′→ 3′外切酶活性 3′→ 5′外切酶活性 5′至3′的聚合活性（ 5′→ 3′ ）  核酸外切酶活性 3′→5′外切酶活性 5′→3′外切酶活性 （二）DNA拓扑异构酶(解旋酶） 既能水解，又能打断碱基互补配对的氢键 拓扑酶Ⅰ 切断DNA双链中的一股 拓扑酶Ⅱ 切断DNA双链 （三）单链DNA结合蛋白（SSB） 维持模板处于单链状态 保护单链的完整 （四）引物酶 是RNA聚合酶，合成一段RNA引物 （五） DNA连接酶（ligase） 催化两段DNA之间的连接 三、DNA的复制过程 （一） 复制的起始 1. DNA复制的起点 原核生物从一个固定的起始点开始，同时向两个方向进行的，称为双向复制 2.复制叉的形成 复制叉----复制开始后由于DNA双链解开，在两股单链上进行复制，形成在显微镜下可看到的叉状结构。 3.起始的过程 3.半不连续复制 (三) 复制的终止 复制有终止信号 polⅠ 5′→ 3′外切酶活性水解引物 polⅠ聚合活性填补空隙 DNA连接酶连接缺口。 五、 DNA的损伤修复 突变可分为： 自发突变、人工诱变 突变的意义 突变是进化、分化的分子基础 只有基因型改变的突变 致死性的突变 突变是某些疾病的发病基础 2. 引发突变的因素 3. 突变分子改变的类型 错配 （点突变） 一个碱基改变 缺失、插入和框移突变 片段插入或缺失 重排 较大片段重组或重排 4. 损伤的修复 损伤--复制过程中发生的DNA突变 光修复 切除修复 重组修复 SOS修复 （一）光修复 紫外光照射可使相邻的两个T 形成二聚体 光修复酶可使二聚体解聚为单体状态，DNA完全恢 复正常。光修复酶的激活需300-600μm波长的光。 （二）切除修复 参与的酶有 核酸内切酶，polⅠ　,DNA连接酶 （三）　重组修复 重组蛋白RecA，polⅠ，连接酶参与 损伤会保留下去 （四）SOS修复 DNA损伤面太大，复制难以继续。 通过SOS修复，复制有可能继续，细胞 有可能存活，但SOS修复机制的特异性低。 对碱基的识别、选择能力差、错误多。 本章重点： 1.DNA半保留半不连续复制的机制 2.DNA复制时保证遗传稳定的内在因素 领头链 随从链 冈崎片段 5 ′ 3 ′ ′ 5 ′ 3 拓扑异构酶 解链酶 单链结合蛋白 DNA聚合酶 引物酶及引发体 DNA连接酶 引物 课堂小结 四、逆转录 1. 逆转录：是以RNA为模板合成 DNA的过程。 2. 逆转录酶：是一种以RNA为模 板的DNA聚合酶。 没有3’ 5’外切酶的活性， 所以没有校对功能，逆转录的 错配率高。 1. DNA 的损伤也称突变，是指DNA分子上 碱基的改变。 诱变因素及突变类型 * DNA 转录 翻译 复制 逆转录 RNA复制 RNA 蛋白质 为什么子女与父母非常相象？ 基因就是指DNA中能编码蛋白质和功能 RNA的特定核苷酸序列。 一、DNA的复制方式 半保留复制(semiconservative replication)----在 DNA复制过程中，双螺旋结构解开而成为单链，分别以DNA双螺旋中的一条链为模板，按碱基互补配对的原则合成两条新的互补链。这样新合成的DNA双链中一股单链是从亲代完整地接受过来的，另一股单链完全重新合成。 （二） 复制的延伸 （三） 复制的终止 θ复制 原核生物DNA的复制 （一） 复制的起始 打开DNA超螺链 打开双螺旋 防止复螺旋 单链结合蛋白 解链酶 引物复合体 引物酶 拓扑异构酶 合成 DNA复制起始的过程 拓扑异构酶 解链酶 单链结合蛋白 DNA聚合酶 引物酶及引发体 DNA连接酶 引物 DNA双链 ′ 5 ′ 3 ′ 5 ′ 3 拓扑异构酶 解链酶 单链结合蛋白 DNA聚合酶 引物酶及引发体 DNA连接酶 引物 DNA复制起始的