《工业微生物》课件 第四章课件.ppt

第五节 消毒与灭菌 抗生素在临床上用来治疗由细菌引起的疾病时，为了避免出现细菌的耐药性，使用时一定要注意：a.第一次使用的药物剂量要足；b.避免在一个时期或长期多次使用同种抗生素；c.不同的抗生素(或与其他药物)混合使用；d.对现有抗生素进行改造；e.筛选新的更有效的抗生素，这样既可以提高治疗效果，又不会使细菌产生抗药性。 第三节 影响微生物生长的因素 4.???有机化合物 酚、醇、醛是常用的杀菌剂。 低浓度的酚可以破坏细胞膜组分，高浓度的酚凝固菌体蛋白。酚还能破坏结合在膜上的氧化酶与脱氢酶，使细胞迅速死亡。 醇是脱水剂，也是脂溶剂。它能使蛋白质脱水死亡，损害细胞膜而具有杀菌力。 醛类的作用主要使蛋白质烷基化，改变酶或者蛋白质的活性，使菌的生长受到抑制或死亡。 第四节 微生物的培养 一、微生物的纯培养技术 微生物在自然界中不仅分布很广，而且都是混杂地生活在一起。要想研究或利用某一种微生物，必须把它从混杂的微生物类群中分离出来，以得到只含有一种微生物的培养。微生物学中将在实验条件下，从一个细胞或同种细胞群繁殖得到的后代称为纯培养。纯培养的获得有下列几种方法，各种方法的优点及应用范围见表4-5。 第四节 微生物的培养 表4-5 微生物纯培养分离方法的比较 第四节 微生物的培养 （一）平板划线分离法 用接种环以无菌操作蘸取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。 第四节 微生物的培养 （二）稀释倒平板法 先将待分离的材料用无菌水做一系列的稀释（如1∶10、1∶100、1∶1000、1∶10000…），然后分别取不同稀释液少许，与已溶化并冷却至45℃左右的琼脂培养基混合，摇匀后，倾入灭过菌的培养皿中，待琼脂凝固后，制成可能含菌的琼脂平板，保温培养一定时间即可长出菌落。如果稀释得当，在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落，这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的。随后挑取该单个菌落，或重复以上操作数次，便可得到纯培养。 第四节 微生物的培养 （三）单孢子或单细胞分离法 采取显微分离法从混杂群体中直接分离单个细胞或单个个体进行培养以获得纯培养，称为单细胞（单孢子）分离法。单细胞分离法的难度与细胞或个体的大小成反比，较大的微生物如藻类、原生动物较容易，个体较小的细菌则较难。在显微镜下使用单孢子分离器进行机械操作，挑取单孢子或单细胞进行培养。也可以采用特制的毛细管在载玻片的琼脂涂层上选取单孢子并切割下来，然后移到合适的培养基上进行培养。单细胞分离法对操作技术有比较高的要求，多限于高度专业化的科学研究中采用。 第四节 微生物的培养 （四）利用选择性培养基分离法 各种微生物对不同的化学试剂、染料、抗生素等具有不同的抵抗能力，利用这些特性可配制合适某种微生物而限制其他微生物生长的选择培养基，用它来培养微生物以获得纯培养。 另外，还可以将样品预处理，消除不希望分离到的微生物。如加温杀死营养菌体而保留芽孢，过滤去除丝状菌体而保留单孢子。 第四节 微生物的培养 二、工业规模的微生物培养 将微生物置于一定容积的培养基中，经过培养生长，最后一次收获，此称分批培养。通过对细菌纯培养生长曲线的分析可知，在分批培养中，培养料一次加入，不予补充和更换。随着微生物的活跃生长，培养基中营养物质逐渐消耗，有害代谢产物不断积累，故细菌的对数期不可能长时间维持。如果在培养器中不断补充新鲜营养物质，并及时不断地以同样速度排出培养物(包括菌体及代谢产物)，从理论上讲，对数生长期就可无限延长。只要培养液的流动量能使分裂繁殖增加的新菌数相当于流出的老菌数，就可保证培养器中总菌量基本不变，此种方法就叫连续培养法。此法已成为当前发酵工业的发展方向。 第四节 微生物的培养 最简单的连续发酵装置包括：培养室、无菌培养基容器以及可自动调节流速(培养基流入，培养物流出)的控制系统，必要时还装有通气、搅拌设备。 控制连续培养的方法