直抗阳性和免疫溶贫课件.ppt

直接抗人球蛋白实验阳性和免疫溶血性贫血 直接抗球蛋白试验 检查受检者红细胞在机体内是否被抗体致敏 产生直抗阳性的条件 自身免疫溶血性贫血 溶血性输血反应 新生儿溶血病 间接抗球蛋白试验 证实红细胞在体外被抗体结合的试验 是检查血清中IgG抗体特异性 或红细胞抗原的重要手段 可用于 未知抗体的检出与确认 交叉配合试验 确认抗原 间接抗球蛋白试验 步骤1：致敏 步骤2：洗涤 步骤3：加入抗人球蛋白试剂（AHG） 增强介质 可以增强反应性和减少孵育时间 LISS 电解质增加溶液的介电常数，减弱了抗原抗体的静电作用。降低离子强度可以显著增加抗原抗体结合率 Polybrene 碱性高分子物质，有效中和红细胞表面负电荷，降低zeta电位，缩短红细胞之间的距离 PeG 极强的亲水性，减少红细胞与抗体周围的水分 22％Bovine albumin Enzymes 增强介质 柱凝集（Column agglutination） 固相技术（Solid-phase technology） 复合方法 抗体筛选方法 抗体筛选方法 DAT阳性血液标本的收集 EDTA抗凝血 提供红细胞 DAT测定，定型，洗脱，自身吸收 不抗凝血 提供血清 抗体筛选，抗体鉴定 DAT阳性血清学研究 多特异性抗球蛋白，抗IgG，抗C3 测定附着在红细胞上的免疫球蛋白的类型 血清抗体筛选与鉴定 自身抗体，同种抗体 自身＋同种抗体 放散试验 确认附着抗体的特异性 直抗（IgG）阳性，而血清与洗脱液皆无反应 需进一步研究： 药物处理细胞，A和B细胞，酶处理细胞 红细胞鉴定 定型 ABO/Rh，磷酸氯奎放散，收集网织红细胞 DAT IgG，C3 放散 阴性：A和B细胞，酶处理，药物处理细胞 阳性：同种抗体，自身抗体，同种＋自身 自身吸收 血清抗体鉴定 阳性 自身抗体 温抗体，冷抗体 同种抗体 特异性鉴定 自身吸收鉴定同种抗体 阴性 IgG抗A，抗B抗体 酶处理细胞 药物依赖抗体 抗体放散方法 红细胞疾病 红细胞增多 红细胞减少 红细胞生成减少 红细胞破坏过多（溶血性贫血） 红细胞丢失过多 溶血性贫血 红细胞内在缺陷 遗传性红细胞增多症 红细胞酶缺乏的贫血 珠蛋白生成障碍性贫血 异常血红蛋白病 阵发性睡眠性血红蛋白尿症 红细胞外来因素 免疫溶血性贫血 机械性溶血性贫血 其它因素引起的溶血性贫血 免疫溶血性贫血的分类 自身免疫溶血性贫血（AIHA） Warm AIHA (WAIHA) Cold Agglutinin Syndrone (CAS) Mixed-type AIHA Paroxysmal Cold Hemoglobinura (PCH) DAT-negative AIHA 同种免疫溶血性贫血 Hemolytic Transfusion Reaction Hemolytic Disease of the Fetus and Newborn (HDFN) 药物诱发的免疫溶血性贫血 Drug-dependent Drug-independent 自身免疫溶血性贫血的血清学特征 温抗体型自身免疫溶血性贫血(WAIHA) 发病率 1/80000，女性比男性高，年龄多数40 病因分类 网状内皮细胞肿瘤 慢性淋巴瘤;霍奇金病;非霍奇金淋巴瘤病 胶原病 系统性红斑狼疮;类风湿性关节炎等 免疫性疾病 免疫缺陷综合症;低球蛋白血症等 胃肠道疾病 某些良性肿瘤 WAIHA 发病机制 免疫调节紊乱 免疫器官对自身红细胞失去识别能力 红细胞膜损伤，改变膜的抗原性 WAIHA 诊断标准 临床表现 起病慢，数月后才发现贫血，表现为全身虚弱及头昏。 各有1/3患者皮肤粘膜苍白及黄胆，半数以上有脾肿大。 实验室检查 1.贫血：程度不一，可暴发急性溶血现象。外周血涂片上可见 多量球形细胞及数量不等的幼红细胞，； 2.骨髓涂片：呈幼红细胞增生象； 3.再生危象：网织红细胞极度减少，骨髓象呈细胞再生障碍， 血象呈全细胞减少； 4.DAT试验