301硕士-分子生物学复习题301硕士-分子生物学复习题.doc

总述 复习题: 1.简述mRNA、tRNA的功能.（39-40） mRNA的功能 携带遗传密码，作为蛋白质生物合成的模板。把DNA所携带的遗传信息，按碱基互补配对原则，抄录并传送至核糖体，用以决定其合成蛋白质的氨基酸排列顺序。 tRNA的功能 活化、搬运氨基酸到核糖体，参与蛋白质的翻译。 2.核酸的变性、复性的概念.（46-47） DNA变性(denaturation)：DNA二级结构和三级结构受到物理化学因素的破坏而解体，但其一级结构核苷酸间共价键并不断裂（DNA分子由稳定的双螺旋结构松解为无规则线性结构的现象。凡能破坏双螺旋稳定性的因素，如加热、极端的pH、有机试剂甲醇、乙醇、尿素及甲酰胺等，均可引起核酸分子变性。 ） 复性 (renaturation)：变性DNA在适合的条件下，又可使两条彼此分开的链重新缔合，按原来的碱基对配对形成双螺旋结构的过程。 影响因素：DNA序列 长度 浓度 3.DNA复制的基本规律（50） ㈠ 半保留复制 新合成的每个子代DNA双链都是由一条保留的亲代和另一条新合成的核苷酸链组成，而称为半保留复制。 ㈡ DNA 新生链延伸方向 DNA 复制中新生链的生长末端是3′端，按5′→3′方向复制。 ㈢ 复制的半不连续性 DNA 复制过程中一条新生链是连续复制，另一条新生链是不连续复制，而称为半不连续复制。 (四)RNA引物引发复制 DNA 复制是由模板链特定序列上RNA 引物合成起始。 前导链合成中，首先合成一小段RNA引物，然后引物3’-OH开始进行DNA聚合反应。 滞后链的不连续合成中，每段岗崎片段起始合成时都要先合成一段RNA引物。 ㈤ 复制起点、复制方向和复制子 ⒈ 复制起点 DNA 复制 是从特定位点(碱基序列)起始，此位点称为复制起点(replication origin, ori)。 ⒉ 复制叉 DNA 开始复制时，亲本DNA 双链在复制起点处解开，DNA 分子上产生“Y”形连接区段，新生链在此合成，此部位称为复制叉。 ⒊ 复制方向 大多数生物的DNA 复制是双向复制。 ⒋ 复制子 基因组中能够独立进行复制的一部分DNA ，称为复制子。它是从一个复制起点到复制的终止点之间的DNA 序列。 ㈥ DNA 复制的忠实性 DNA 复制具有高度忠实性。 主要保证因素： DNA 聚合酶的校正功能 细胞内错配修复糸统 RNA 引物的作用 ⒈ DNA 聚合酶的校正功能 DNA 聚合酶除聚合活性外至少具有一种核酸外切酶活性。 DNA 聚合酶的3′→5′核酸外切酶活性在DNA复制中起校正作用，纠正链合成中偶发的碱基错配，降低了DNA复制错配频率。 DNA 聚合酶5′→3′核酸外切酶活性，对DNA复制中冈崎片段5′末端RNA引物的切除，及损伤修复起重要作用。 ⒉ 错配修复系统 错配修复系统纠正了DNA 聚合酶校正作用的差错，提高了DNA 复制的精确性。 ⒊ RNA 引物的作用 DNA 复制要有RNA 引物引发，随后RNA 引物要被切除，而不使用不必被清除的DNA引物，提高了DNA 复制的精确性。 4.名词： 端粒和端粒酶(62) 端粒 Telomere 真核生物染色体末端由许多简单重复序列和相关蛋白质组成的复合结构，具有维持染色体结构完整性和解决其末端复制难题的作用。 端粒酶 Telomerase 由蛋白质和RNA组成的一种逆转录酶，以自身RNA为模板，合成端粒重复序列，加到新合成DNA链末端。人体内端粒酶出现在大多数的胚胎组织、生殖细胞、炎性细胞、更新组织的增生细胞以及肿瘤细胞中。端粒酶活性的缺失将导致端粒缩短。 半保留复制(50) 新合成的每个子代DNA双链都是由一条保留的亲代和另一条新合成的核苷酸链组成，称为半保留复制。 复制叉(54) DNA 开始复制时，亲本DNA 双链在复制起点处解开，DNA 分子上产生“Y”形连接区段，新生链在此合成，此部位称为复制叉。 基因(36) 基因（gene）：一段有功能的DNA片段，生物细胞中DNA分子的最小功能单位 基因工程 名词解释: (1)基因工程 （8） 在体外条件下，人工将DNA分子“剪切”并重新“拼接”，形成一个新的杂合的DNA分子，然后将它导入微生物或真核细胞中表达，产生人类所需要的基因产物或改造、创造新的生物类型的生物技术 载体 载体是供插入目的基因并将其导入宿主细胞内表达和复制的运载工具。 （DNA片段的克隆需要合适的载体，载体一般为质粒，噬菌体或病毒，通常大多经过人工改造。 为了便于获得阳性克隆，载体上常有筛选标记，如抗菌素的抗性，某些基因产物的显色反应等。） 问答题: 基因工程的基本程序？（8） 1. 目的基因（外源基因）DNA片段获得 2