第七章仪器分析2.pptVIP

第二节 免疫分析方法及其应用 一 放射免疫分析法 利用放射性核素可探测的灵敏性，精确性与抗原抗体反应的特异性相结合而创建的一类免疫测定技术。 基本类型和原理 竞争性结合反应：放射免疫分析(RIA）--以放射核素标记抗原与反应系统中未标记的抗原竞争特异性抗体的基本原理来测定待检样品中抗原量的分析方法。 非竞争性结合反应：免疫放射分析(IRMA)—用放射性核素标记的过量抗体非竞争结合抗原，经固相分离，测定待测样品中抗原量的分析方法。 2.常用的放射性核素 125I、131I、3H、14C。 3. 标记物的制备及鉴定 标记物：是指通过直接或间接的化学反应将放射性核素连接到被标记分子上锁形成的化合物。 要求：高比度、高纯度、完整的免疫活性、不能破坏抗原决定簇。 直接标记法（铬氨酸残基和组氨残基） 间接标记法（联接标记，引入添加基团） 标记物的纯化：采用分离的方法—离子交换层析法。 标记物的鉴定：放射化学纯度、免疫活性、比放射性（计算法和自身置换法）。 4. 放射免疫分析一、原理： Ag + Ab AgAb + Ag + * Ag * AgAb + * Ag * Ag和 Ab量恒定， Ag的量为一个系列浓度。 抗原抗体复合物与标准抗原的关系 * AgAb复合物的量取决于A