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- 2016-12-24 发布于湖北
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重离子辐照玉米的SSR分子标记分析 演讲:何凯 制作:储坤 魏吉银 答辩:赖圣伟 基本步骤 1试验材料 选取由‘zC6+离子束辐照处理的玉米自交系CSR24001-1,鲁9801、金象4C-1和郑58、478、308。 1.1样品采集 供试材料选取籽粒饱满的玉米种子,用水浸泡3-5 h,蒸馏水冲洗,置铺于有蛙 石的培养皿中,于25 0C培养箱暗培养,待幼苗长至5-6 d后剪取叶片迅速放入冰盒, 以免水分散失。 2.1技术路线 该实验选取田间经不同能量、不同通量和不同处理的‘zC6+离子束辐照处理和未 辐射对照玉米种子实验室种植,选取幼嫩叶片为材料,进行玉米基因组DNA的提取, 选用可扩增引物进行PCR扩增,通过SSR分子标记的分析研究辐照植株与未辐射对 照植株之间的遗传变异并进行类群的划分,选出具有较大差异的材料。 2.2药品试剂及试验设备 2.2.1药品试剂 本试验所用化学试剂均为分析纯:TaqDNA聚合酶,琼脂糖,dNTPs溟化乙锭, 选用玉米通用SSR引物。 2.2.2仪器设备高速低温离心机, PCR扩增仪电冰箱,水浴锅,电泳仪,凝胶成像系统 。 2.3。1基因组DNA的提取 1 SDS快速提取法 2 CTAB法 2.3. 2DNA的检测 用TU-1810紫外分光光度计和0.8%的琼脂糖凝胶电泳检测。
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