乳铁蛋白结合聚乙二醇聚乳酸纳米粒脑内递药特性的体内外研究..docVIP

乳铁蛋白结合聚乙二醇聚乳酸纳米粒脑内递药特性的体内外研究 （复旦大学药学院药剂教研室，上海 200032） 摘要：目的 构建一种新型可生物降解脑内递药系统-乳铁蛋白结合聚乙二醇聚乳酸纳米粒（Lf-NP），并对其脑内递药特性进行体内外评价。 方法 采用马来酰亚胺基聚乙二醇-聚乳酸和甲氧基聚乙二醇-聚乳酸通过复乳溶剂挥发法制备纳米粒（NP）,将其与巯基化的乳铁蛋白（Lf）共价连接制得Lf-NP。采用透射电镜技术，免疫电镜技术，动态光散射分析，X-射线光电子能谱分析及酶联免疫吸附试验对Lf-NP的形态,粒径和表面Lf的连接进行鉴定和表征。以香豆素-6为荧光探针定性及定量的研究了小鼠脑毛细血管内皮细胞bEnd.3对Lf-NP的摄取情况。采用CCK-8Lf-NP对细胞活力的影响。利用荧光显微技术和冷冻切片技术观察小鼠尾静脉注射载香豆素-6的Lf-NP后的脑内分布情况并进行了药动学研究。 结果 制得的Lf-NP形态圆整，粒径在110 nm左右。免疫电镜技术，X-射线光电子能谱分析及酶联免疫吸附试验证实了Lf-NP表面共价连接有Lf，且每个Lf-NP表面的Lf数约为55。bEnd.3对Lf-NP的摄取在37℃，不同浓度和不同孵育时间条件下均显著高于未结合纳米粒（NP）。静脉注射载香豆素-6的纳米粒后，Lf-NP组小鼠脑内香豆素-6的量约为NP组的3倍。3 mg/ml的Lf-NP对bEnd