郜刚分子生物学真核基因表达调控蛋白质磷酸化对基因转录的调控.pptVIP

8.3蛋白质磷酸化与基因转录调控 本节重点： A激酶信号传递与基因表达 C激酶信号传递与基因表达 1、细胞应答 细胞是生命活动的基本单位。细胞通过DNA的复制和细胞分裂将本身所固有的遗传信息由亲代传至子代，实现增殖繁衍。它们还不断地“感知”环境变化，并对其作出特定的应答。 细胞应答可以分为3个阶段： 外界信息的“感知”，即由细胞膜到细胞核内的信息传递, 染色质水平上的基因活性调控, 特定基因的表达，即从DNA→RNA→蛋白质的遗传信息传递过程。 细胞信号发放（cell signaling），细胞释放信号分子，将信息传递给其它细胞。 细胞通讯（cell communication）指一个细胞发出的信息通过介质传递到另一个细胞产生相应反应的过程。 细胞识别（cell recognition）指细胞与细胞之间通过细胞表面的信息分子相互作用，从而引起细胞反应的现象 信号转导（signal transduction） 指外界信号（如光、电、化学分子）与细胞细胞表面受体作用，通过影响细胞内信使的水平变化，进而引起细胞应答反应的一系列过程。 信号转导的复习 信号转导——细胞外刺激信号作用于细胞的特殊结构，通过一系列反应实现对细胞功能活动的调控。 1、细胞外刺激信号：胞外信息分子：配体 一般为生物活性物质： 神经递质、激素、细胞因子等， 多数为水溶性物质 2、受体(receptor) 概念：位于细胞膜或细胞内能与某些信号物质（激素，神经递质，抗原细胞粘附分子、药物毒素）结合并能引起特定生物效应的大分子 化学本质：多为蛋白质，个别是糖脂 受体与配体结合的特点： (1) 特异性：高亲和力的空间结构互补 (2) 可逆性：以非共价键（H键、离子键、VDW力）结合 (3) 饱和性：受体数目有限 (4) 传递信息： 将二者相互作用产生的信息传递到第二信使或效应器上，如酶、离子通道等 2、受体(receptor) 分类：据受体在效应细胞上的部位分2类 1）细胞内受体 即DNA转录调节性R，位于胞浆和核内。 2）膜受体 据受体结构和信息传递机制又分3类：①G蛋白偶联R；②配体门控离子通道；③酪氨酸蛋白激酶性R 据受体结构和信号转导机制、分为4型 受体的结构与功能 三类膜受体 受体分子活化细胞功能的途径 主要有两条 内源酪氨酸激酶途径：受体本身或受体结合蛋白具有内源酪氨酸激酶活性，胞内信号通过酪氨酸激酶途径得到传递； G蛋白介异的激酶途径：配体与细胞表面受体结合，通过G蛋白介异的效应系统产生介质，活化丝氨酸/苏氨酸或酪氨酸激酶，从而传递信号。 G蛋白 GTP结合蛋白或GTP结合调节蛋白，广泛存在于各种组织细胞膜上。是（G蛋白偶联）受体与效应酶（酶或离子通道）之间的中介物质，是一种酶 G蛋白均通过第二信使引起级联反应，产生生物效应。配体与受体结合后，通过G蛋白，才能将信号传递到效应系统 G蛋白的结构及功能 G蛋白种类繁多，结构相似，都是膜蛋白， 都由αβγ3个基组成，不同G蛋白α不同， βγ相同（似），互换不影响G蛋白功能。 α：MW39～46KD，含GTP、GDP受体3个结合位点，有GTPase活性，可水解GTP→GDP＋Pi，是决定G蛋白功能亚基。 β35KD 与 γ10KD：常组成紧密二聚体，其主要功能是调节α亚基活性在某些细胞也直接参入效应酶的调节 G蛋白类型 兴奋性G蛋白（Gs）：能激活腺苷酸环化酶（AC）使 cAMP增加 抑制性G蛋白（Gi)：能抑制腺苷酸环化酶（AC）使 cAMP减少 Gplc—介导磷脂酶C（PLC）水解肌醇脂质，生成IP3和DG。 小GTP结合蛋白 ras超家族 ras超家族是与G蛋白α亚基有同源性单体小分子蛋白，同样具有GTP结合位点和GTPase活化 第一信使、第二信使、第三信使 脂溶性信号分子，如甾类激素和甲状腺素，可直接穿膜进入靶细胞，与胞内受体结合形成激素-受体复合物，调节基因表达。 水溶性信号分子，如神经递质、细胞因子和水溶性激素，不能穿过靶细胞膜，只能与膜受体结合，经信号转换机制，通过胞内信使（如cAMP）或激活膜受体的激酶活性（如受体酪氨酸激酶），引起细胞的应答反应。所以这类信号分子又称为第一信使（primary messenger），而cAMP这样的胞内信号分子被称为第二信使（secondary messenger）。 第二信使有cAMP、cGMP、三磷酸肌醇（IP3）和二酰基甘油（DAG）， Ca2+被称为第三信使是因为其释放有赖于第二信使。 Ca2+ Ca2+是细胞功能调节最重要的阳离子。胞外Ca2+浓度高出细胞内1万倍