蛇床子素对兔肝大部切除后胰岛素抵抗的影响.docVIP

蛇床子素对兔肝大部切除后胰岛素抵抗的影响 　　【摘 要】目的：研究肝大部切除后兔胰岛素抵抗的变化，初步探讨蛇床子素（Osthole， Ost）对创伤后胰岛素抵抗的影响。方法：将32只家兔随机分为4组（n=8）：假手术（SO）组、肝大部切除（PH）组和Ost不同剂量组（5和10 mg.kg-1）。分别于麻醉后即刻（T0）、术后6 h和24 h （T1～T2）采集静脉血，测定血糖、血清胰岛素、肿瘤坏死因子（TNF）-α和白细胞介素（IL）-6，计算胰岛素敏感指数（ISI）及胰岛素抵抗指数（IRI）。结果：与T0时比较，PH和Ost组T1时刻TNF-α、IL-6、血糖、胰岛素水平及IRI均升高，ISI下降（P 0.05）；与SO组比较，T1时PH组和Ost组TNF-α、IL-6、血糖、胰岛素水平及IRI均升高，ISI下降（P 0.05）；与PH组比较，T1～T2时Ost各组TNF-α、IL-6、血糖、胰岛素水平及IRI均降低，ISI升高（P 0.05或0.01）。结论：肝大部切除后炎性因子增加，产生明显的胰岛素抵抗。蛇床子素对其具有改善作用，可能与抑制促炎因子释放有关。 　　【关键词】蛇床子素；肝叶切除；促炎因子；胰岛素抵抗 　　【文献标识码】B 【文章编号】1004-7484（2014）02-0426-02 　　胰岛素抵抗（ insulin resistance， IR）是指胰岛素的外周靶器官对内源性或外源性胰岛素的敏感性和反应性降低，导致生理剂量的胰岛素产生低于正常的生理效应，其显著特点为高糖血症。创伤早期可引起明显的IR，其对机体的干扰已成为围术期迫切解决的问题[1]。促炎细胞因子在其中起了重要作用，研究发现[2]蛇床子素（Osthole， Ost）及其衍生物有显著的抗炎效应，对机体炎症反应具有一定的调节作用。本研究旨在探讨肝大部切除IR的变化情况及Ost的影响。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验药物及试剂 　　蛇床子素由四川成都龙泉高科天然药业有限公司提供（质量分数96 %） ，实验前用N-2甲基甲酰胺溶解，聚山梨酯-80助溶后用生理盐水稀释至所需浓度；溶剂对照液含N-2甲基甲酰胺-聚山梨酯-80-生理盐水（1：1：8）。肿瘤坏死因子（TNF）-α，白细胞介素（IL）-6的ELISA试剂盒购自南京建成生物技术有限公司，其它试剂为市售分析纯。 　　1.2 实验动物及分组 　　32只健康成年普通级家兔，体重1.8-2.5kg（平均2.1 kg），雌雄各半，由泸州医学院实验动物中心提供（合格证号： SCXK（川）-201137）。实验前，适应性饲养1周。将实验家兔用随机数字表法分为4组（n=8）：假手术（SO）组；肝大部切除（PH）组； 蛇床子素（Ost） 5和10 mg.kg-1组。 　　1.3 主要实验器材 　　血糖测定采用One-Touch Ⅱ型微型血糖仪；血清胰岛素测定采用ARIMZYMEⅡ型内分泌定量测定仪；光学酶标仪 ；紫外分光光度计；超速低温离心机。 　　1.4 方法 　　1.4.1 肝大部切除模型的制备 　　PH手术均在上午8～10时进行，术前动物禁食12 h，自由饮水。左耳缘静脉置管，25 g/L戊巴比妥钠（1 ml/kg）经左耳缘静脉注射麻醉，无菌手术操作。PH手术依据既往研究[3]方法，腹部正中7-8cm切口，行肝左叶1/2切除术（以叶间切迹为标准），关闭腹腔。SO组翻动肝左叶，不作肝叶切除，其余同PH组，然后关闭腹腔。术后保温并自由进食、水。 　　1.4.2 实验给药及标本采集 　　Ost组在PH 1 h前给予耳缘静脉注射Ost 5或10 mg.kg-1，共2 ml；SO组、PH组给予耳缘静脉注射等体积的溶剂。每组麻醉后即刻（T0），术后6（T1）和24 h（T2）共3个动态观察时间点采集静脉血。 　　1.4.3 TNF-α、IL-6和血糖、血清胰岛素的检测 　　分别在各观察时点测定各组动物TNF-α、IL-6和血糖、血清胰岛素。每次取耳缘静脉血1滴用One Touch Ⅱ型微型血糖仪测定血糖；另取血约5 ml，4℃下内离心（ 3000r /min，时间20min），提取上层血清，冻存管密封，保存于-80℃冰箱中，备检测。采用ELISA法测定TNF-α及IL-6，放射免疫法测定血清胰岛素。胰岛素敏感指数（ISI）以ISI= ln[1/（血糖×胰岛素）]计算，胰岛素抵抗指数（IRI）以空腹血糖×空腹胰岛素/22.5计算[4，5]。 　　1.5 统计学处理 　　采用SPSS13.0统计软件行数据处理，计量资料用均数±标准差（ ±s）表示，组间差异采用重复测量方差分析， 两两间比较采用q检验，P 0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 血清