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沉默VEGF基因对腺样囊性癌细胞侵袭的影响 　　【摘要】 目的：利用RNAi技术沉默腺样囊性癌细胞株ACC-2中VEGF的表达，探讨其对肿瘤细胞侵袭能力的影响。方法：利用RNAi技术沉默VEGF表达，用Transwell侵袭实验检测细胞体外侵袭能力的变化。结果：与对照组比较，VEGF的siRNA能有效地抑制实验组ACC-2细胞的侵袭能力。结论：沉默VEGF减弱腺样囊性癌的侵袭能力。 　　【关键词】 涎腺腺样囊性癌； 血管内皮生长因子； RNA干扰； 侵袭 　　The Study of the Influence on Invasiveness Activity of ACC-2 Cells Via RNAi VEGF/HUANG Yan-ting，LAO Jun-ping.//Medical Innovation of China，2014，11（12）：037-038 　　【Abstract】 Objective：To investigate the inhibitory effects of VEGF targeted small interference RNA（siRNA） on invasiveness of salivary adenoid cystic carcinoma（SACC） cell line ACC-2. Method： VEGFsiRNA was transfect into SACC cell line ACC-2 and then examine the changes of invasive ability of ACC-M. Result： The invasive and proliferative abilities of ACC-2 decreased， and the difference between the two groups were statistically significant（P0.05）. Conclusion：Si-VEGF can effectively decrease invasiveness of SACC cells. 　　【Key words】 Salivary adenoid cystic carcinoma； Vasculare endothelial growth factor； RNA interference； Invasiveness 　　First-author’s address：The First People’s Hospital of Foshan City，Foshan 528000，China 　　doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2014.12.013 　　涎腺腺样囊性癌（salivary adenoid cystic carcinoma， SACC）是口腔颌面部常见的恶性肿瘤之一，约占口腔恶性肿瘤的六分之一。腺样囊性癌具有嗜神经侵袭以及跳跃性转移的特点。手术预后差，侵袭以及转移是患者的主要病因之一[1-2]。 　　血管内皮生长因子（vasculare endothelial growth factor，VEGF）是一种强烈诱导血管生成的细胞因子，在肾癌、乳腺癌、黑色素瘤、肝癌、胃癌、膀胱癌、子宫内膜癌以及胚胎组织性肿瘤中多有报道。肿瘤组织中VEGF表达水平与恶性程度成正相关，并明显高于非肿瘤组织[3-4]。这表明VEGF可能通过促进血管形成等方式促进肿瘤的生长，尤其在高度血管化的肿瘤中。VEGF及其受体是血管生成的关键因子，其过度表达与肿瘤生长、侵袭及转移关系密切[5]。 　　1 资料与方法 　　1.1 细胞培养 腺样囊性癌细胞系低转移株（ACC-2）由中山大学附属孙逸仙医院李劲松教授馈赠。两株细胞培养于10%的FBS、100 U/mL青霉素和0.1 mg/mL链霉素的DMEM培养液，置于37 ℃，5%（v/v）CO2饱和湿度恒温培养箱中培养。 　　1.2 siRNA的设计和转染 VEGF特异性干扰片段参照之前文献设计。片段序列为：GGCGTCGCACTGAAACTTT，由吉玛生物合成。 　　1.3 mRNA的提取和检测 细胞株的mRNA的提取和cDNA的合成。TRIzol法提取细胞株中总的RNA，cDNA的合成采用M-MLV反转录试剂盒（Promega）。VEGF引物的设计如下：VEGF基因：上游引物：5’-GATCCTGCCCTGTCTCTCTG-3’；下游引物：5’-GACTCGCCCTCATCCTCTT-3’。内参GAPDH基因：上游引物：5’-GCCTCAAGATCATCAGCAATGC-3’；下游引物：5’-CATGGACTGTGGTCATGAGTC