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生化检验在临床治疗中的作用及实施方法的探讨
【摘要】 生物化学检验技术是一门实践性强、操作性要求高的技术学科,它是以无机化学、分析化学、有机化学、仪器分析、生物化学和物理学为基础。随着科学技术的快速发展,不断产生新的检测技术和相应的仪器设备,加之自动生化分析仪的使用和分子生物学技术的发展,临床生物化学分析的质和量获得了精确的保证,这标志着临床生物化学检验技术已经迈进了新的发展阶段。本文简述了生化检验在临床治疗中的作用、治疗方法,举例分析了生化检验在临床治疗中的技术运用,提出今后生化检验技术应加强质量管理。
【关键词】 生化检验;临床治疗;治疗作用;方法;改进
随着科学技术的迅速发展,新技术、新仪器、新试剂盒在生化检验工作中的大量应用,生化检测方法的灵敏度和特异性都有了显著的提高,生化检验在临床治疗中的作用越来越大,检验方法也越来越多。
1 生化检验在临床治疗中的作用、实施方法、实例分析
1.1 生化检验在临床治疗中的作用 疾病诊断:根据病史、病人的症状、体征特点、相关的检查报告以及对治疗的反映情况作出医学诊断。当各种检验信息相吻合时,容易作出肯定的诊断;当各种检验信息不吻合时,就可能会提出一系列猜测性实验的诊断。因此,选择适当的生化检验,可以确证或者排除某些诊断结果。
预测判断:生化检验可以提供预后判断的信息,如:连续监测肾脏疾病患者的血清肌酐浓度,可以预测多久对病人进行一次透析;可以根据血清胆固醇的浓度,预测特殊人群冠心病发生的危险度概率。
监测治疗:大多数的生化检验会用于观察疾病的发展过程和监测治疗的效果,如:监测糖尿病患者的血糖浓度及治疗前后的差异,确定治疗效果。生化检验还可以用于监测因治疗产生的并发症状,如:利尿治疗引起的低钾血症。
隐患筛选:生化检验广泛用于检测人体是否存在有某种亚临床疾病,如:在欧美一些国家,对所有新生儿都要进行苯丙酮尿症(phenylketonuria,PKU)的筛选。
1.2 生化检验在临床治疗中的实施方法 根据临床治疗中生化检验准确度与精密度的不同,可以分为决定性方法、参考方法、常规方法等三级:决定性方法(definitive method),是指准确度最高,系统误差最小,通过详细的研究,并没有发现产生误差的原因,也没有发现某些方面不够明确的方法,通用于发展及评价参考方法和一级标准品;参考方法(reference method),是指准确度与精密度已经得到充分证实的分析方法,干扰因素少,系统误差与重复测定的随机误差相比,可以忽略不计,拥有适当的灵敏度、特异性及较宽的分析范围,这类方法在条件许可的实验室中经常使用,多用于评价常规方法和试剂盒,鉴定二级标准品;常规方法(routine method),是指性能指标符合临床的需要,有足够的精密度、准确度、特异性和适当的分析范围,而且经济实用,这类方法经过有关学术组织的认可后,可称之为推荐方法(recommended method),推荐方法应该具有足够的实验证据。
1.3 生化检验在临床治疗中的实例分析:血清乳酸脱氢酶的测定 关键词:PH值对其反应的影响、LDH、糖酵解酶、氧化还原反应 、LDH1-LDH5 LDH分布和特点:广泛分布,主要在肾,其次在心,骨骼肌,其它肝、脾、胰、肺。上述组织病变,血清中的LDH催化乳酸氧化成丙酮酸,同时将氢转移给辅酶而成为NADH,依条件不同而有可逆性 。在PH值在碱性范围是为正反应(L-P);PH值中性时为逆反应(P-L)。
连续监测法(酶法):原理是L-乳酸+NAD+PH8.8-9.8丙酮酸+NADH+H+,因为逆反应比正反应速度快两到三倍,所以反应偏向左侧,多用逆反应:丙酮酸+NADH+H+PH7.4-7.8乳酸+NAD+,在37℃的反应条件下,通过340nm处监测,吸光度下降幅度与LDH成正比。参考值为240-460u/L。
注意事项:逆反应具有以下优点:试剂用量少,所需NAD+,只是L-P所用的3%;在单位时间内的吸光度变化大,逆反应线性范围较大,酶促反应速率比正反应快3倍,有利于测定,且时间短;酶活力随时间的线性关系较长。正反应优点:NADH+H+比NAD+稳定,价格较低,容易得到纯品,底物乳酸与逆反应底物丙酮酸稳;乳酸对LDH的抑制低于丙酮酸对LDH的抑制;连续监测法可利用正、逆反应,优于比色法;金属离子的存在可以降低NAD+的稳定性,试剂中可以加入EDTA,使EDTA络合金属离子,增加NAD+的稳定性;NAD+不稳定,产生对LDH有抑制作用的物质,在碱性液中比在酸性液中更稳定,在Tris缓冲液中比在磷酸盐缓冲液中稳定;某些批号的NADH+H+还含有LDH的物质,使用前检查NADH+H+的质量,NADH+H+溶于Tris缓冲
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