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实验外科手术概论—动物实验技术 上海交通大学附属第六人民医院 动物实验室丁在咸 实验外科手术目的与伦理 实验动物和实验研究人员的技术 动物实验的术前准备 实验动物麻醉及麻醉药物 实验人员着装及无菌操作 术后观察、治疗及实验性给药 部分动物实验操作技术图片 1.1实验外科手术基本目的 因人类生命科学、药学和医学和临床教学等科学实验需要,以实验动物为研究对象,运用外科技术和方法,研究和观察实验动物在组织解剖学、组织病理学、生物医学工程和动物实验模型等方面的的反应、变化和结果。 1.2实验外科的伦理原则: 可以采用非手术方法完成的研究课题应当尽量采用非手术的实验方法; 有条件使用外科微创技术和介入技术的研究课题应当放弃常规外科手术方法; 可以减少实验动物使用数量的,必须优化课题设计和实验技术路线以及实施方案,尽一切可能减少实验动物的使用数量; 整个实验手术过程应当遵循“关爱、善待、无痛和尽可能减少手术创伤”伦理原则; 应当尽可能避免被试动物在情绪、肉体、饲养和环境等方面的恐惧、紧张、疼痛和非实验因素的创伤,并满足被试动物在饲养、营养、环境条件以及情绪和行为感官方面的福利需要。 1.3实验外科手术技术 包括熟练的手术麻醉、麻醉监护与管理; 普通外科和专业外科技术、外科微创技术; 实验室检查、诊断和临床观察、实验性用药及治疗等技术。 2.实验动物和实验人员技术 采购符合实验要求的实验动物,并加强消毒隔离和动物防疫接种等措施。 新环境条件适应和情绪调整期:一般小动物为10天,大动物为14~21天。 动物实验外科手术设施、设备和手术器械准备 动物实验设施应符合国家标准,设施级别应与实验动物等级相匹配。 动物实验设施环境控制应符合国家标准,符合外科手术和麻醉要求。 动物实验课题技术路线的可行性; 实验手术方案设计的严密性和成熟性,必要时应及时修改; 外科操作人员技术水平和均一程度; 手术、麻醉人员、辅助人员的工作责任性; 应急情况的处理预案; 实验手术必备的药物、试剂、医用材料、手术设备和器械等。 3.术前准备 3.1动物术前禁食:应考虑到实验动物种系的生物学特点,以及各实验动物部门动物饲养的习惯,通常情况下: 啮齿类动物一般为:8~12小时,鼠类动物应在夜间禁食; 哺乳类动物一般为:12~24小时,少数实验手术为:36小时,如手术对消化道、血液、体液或实验标本等有特殊要求的则根据实验要求决定。但对动物禁食超过36小时后,该动物对实验或外科手术的耐受能力和术后麻醉复苏会带耒非常不利的影响,尤其是一周内已数次全身麻醉的动物。 被试动物已按实验要求做好了其他有关准备:如术前实验性给药、术区备皮等。 对于禁食时间较长的动物,在不影响实验数据的前提下,手术麻醉初始的静脉补液可多考虑给以适当的能量补充。 3.2手术区域的皮肤准备: 剪毛法:最好是专用剪刀。 推剪法:使用电动推剪(最好是动物专用电动推剪); 剃毛法:剃刀或手术刀片刮除; 脱毛法:化学药物,如硫化钠,硫化钡。 拔毛:不提倡。 4.实验动物麻醉及麻醉药物 4.1实验动物的给药方法:在动物实验中,为了观察药物对生命活动、生物代谢以及器官功能引起的变化。根据实验手术的需要,麻醉给药的途径和方法是多种多样的。同时也可参照实验动物种类和药物剂型、剂量等情况确定。 4.2经消化道给药:口服 随饮水或日粮自然喂服 加工在饲料中饲料 人为诱服 经口灌胃 直肠给药 4.3经呼吸道给药 随空气吸入(如自然吸入、乙醚麻醉吸入、超声雾化吸入); 随麻醉机或呼吸机吸入(如笑气麻醉); 随咽喉镜或气管镜给药。 4.4经皮肤、肌肉注射给药 皮内注射 皮下注射 肌肉注射 皮肤渗透 4.5腹腔注射给药 腹腔注射:先将动物固定,腹部用酒精棉球擦试消毒,然后在左或右侧腹部将针头刺入皮下,沿皮下向前推进约0.5厘米,再使针头与皮肤呈45 度角方向穿过腹肌刺入腹腔,此时有落空感,回抽无肠液、尿液后,缓缓推入药液。 为避免伤及内脏,可使动物处于头低位,使内脏移向上腹。此法大小鼠用的较多。若实验动物为家兔,进针部位为下腹部的腹白线离开1cm处。 4.6经血管给药 经体表浅、深静脉或动脉注射 〖静脉注射〗:是将药液直接注射于静脉管内,使其随着血液分布全身,迅速奏效(排泄较快,相对作用时间较短) ; 经微创技术给药:光纤内窥镜、X光数字减影导管技术、超声定位穿刺等介入技术给药。 手术区局部给药(如局部麻醉给药、局部镇痛治疗技术) 其他给药方法:椎管麻醉、神经根阻滞麻醉等。 4.7麻醉与复苏 动物实验手术麻醉目的:为免除实验动物在实验过程中因手术创伤造成的情绪恐惧和机体疼痛,使其处于镇静、睡眠或无痛的状态,便于外科手术操作,而对被试动物施以一定的镇静、镇痛、麻醉等措施。 根据实验目的和方法以及动物种类的不同,所采用的麻醉方
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