Chapter2.蛋白质教案.pptVIP

习惯分类方法 芳香族氨基酸：Trp、Tyr、Phe 含羟基氨基酸：Ser、Thr、Tyr 含硫氨基酸：Cys、Met 杂环族氨基酸：His 杂环族亚氨基酸：Pro 支链氨基酸：Val、Leu、Ile 　 几种特殊氨基酸 Gly：无手性碳原子。 Pro：为环状亚氨基酸。 Cys：可形成二硫键。 多肽链的选择性降解 酶解法: 胰蛋白酶，糜蛋白酶，胃蛋白酶，嗜热菌蛋白酶，羧肽酶和氨肽酶 化学法：(Cyanogenbromide)溴化氰水解法，它能选择性地切割由甲硫氨酸的羧基所形成的肽键。 (一）蛋白质的分类 电 泳 蛋白质在等电点pH条件下，不发生电泳现象。利用蛋白质的电泳现象，可以将蛋白质进行分离纯化 2. 蛋白质胶体性质 由于蛋白质的分子量很大，它在水中能够形成胶体溶液。蛋白质溶液具有胶体溶液的典型性质，如丁达尔现象、布郎运动等。 蛋白质胶体性质的应用 透析法:利用蛋白质不能透过半透膜的的性质，将含有小分子杂质的蛋白质溶液放入透析袋再置于流水中，小分子杂质被透析出，大分子蛋白质留在袋中，以达到纯化蛋白质的目的。这种方法称为透析（dialysis）。 盐析法:在蛋白质溶液中加入高浓度的硫酸铵、氯化钠等中性盐，可有效地破坏蛋白质颗粒的水化层。同时又中和了蛋白质表面的电荷，从而使蛋白质颗粒集聚而生成沉淀，这种现象称为盐析（salting out）。 3. 蛋白质的沉淀作用 如果加入适当的试剂使蛋白质分子处于等电点状态或失去水化层（消除相同电荷，除去水膜），蛋白质胶体溶液就不再稳定并将产生沉淀。 选择性沉淀蛋白质的方法 ①盐析法:大量的中性盐可使蛋白质脱去水化层而聚集沉淀。 ②有机溶剂沉淀法：破坏水化膜 ③重金属盐沉淀：pH＞pI时，与重金属离子结成不溶性沉淀 ④生物碱试剂和某些酸类沉淀法：pH小于等电时，蛋白质带正电荷，易与生物碱试剂和酸类的负离子生成不溶性沉淀。 ⑤加热变性沉淀 ⑥等电点沉淀法 5. 蛋白质的紫外吸收 由于蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸，因此在280nm波长处有特征性吸收峰。蛋白质的OD280与其浓度呈正比关系，因此可作蛋白质定量测定。 （三）蛋白质分离纯化 蛋白质各自所特有的高级结构，是表现其物理性质和化学特性以及生物学功能的基础。当天然蛋白质受到某些物理因素和化学因素的影响，使其分子内部原有的高级构象发生变化时，蛋白质的理化性质和生物学功能都随之改变或丧失，但并未导致其一级结构的变化，这种现象称为变性作用（denaturation） 蛋白质的变性作用如果不过于剧烈，则是一种可逆过程，变性蛋白质通常在除去变性因素后，可缓慢地重新自发折叠成原来的构象，恢复原有的理化性质和生物活性，这种现象成为复性（renaturation）。 4.? 蛋白质的变性与复性 变性的因素： 如加热、乙醇等有机溶剂、强酸、强碱、重金属离子及生物碱试剂等 。 蛋白质变性后，往往出现下列现象： ①生物活性丧失 ②硫水基团外露，分子结构伸展松散，易被蛋白酶水解。 ③溶解度降低、沉淀。 变性的实质： 次级键（有时包括二硫键）被破坏，天然构象解体。变性不涉及一级结构的破坏。 应用：变性灭菌、消毒；此外, 防止蛋白质变性也是有效保存蛋白质制剂（如疫苗等）的必要条件。 抗利尿素与催产素(9肽)、胰高血糖素（29肽）、脑啡肽（5肽）、 降钙素（32肽）、 ACTH（39肽）、胰岛素（51肽）肌肽（2肽）、 β内啡肽（31肽） 1.氨基酸的结构通式为 。 2.氨基酸在等电点时，主要以_____________离子形式存在， 在pHpI的溶液中，大部分以______离子形式存在，在 pHpI的溶液中，大部分以_____离子形式存在。 3. 测定蛋白质紫外吸收的波长，一般在____________，主要由于蛋白质中存在着____________ 、 ____________ 、 ____________ ___氨基酸残基。 4. 下列哪种氨基酸可使肽链之间形成共价交联结构（ ） A.Met B. Ser C. Glu D. Cys 第二节???? 蛋白质的分子结构 蛋白质的分子结构包括 一级结构(primary structure) 二级结构(secondary structure) 三级结构(tertiary structure) 四级结构(quaternary structure) 高级结构 一、一级结构（共价结构）： 定义:多肽链中氨基酸的排列顺序，包括二硫键的位置称为蛋白质的一级结构(primary structure)。 主要的化学