《3分光光度计PPT.ppt

罗怕特-威廉-本生光谱分析法的发明者 1811年3月31日出生在德国哥廷根 ，他的发现用氢氧化铁作为砷中毒的解毒药的办法。 1859年本生和基尔霍夫研究加热的金属的放射光谱。完善了汽灯，发明了本生灯。此灯的温度可达230O°C，且没有颜色 吸收光谱曲线绘制 以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，描出所有测量的点，用曲线连接 在坐标轴上标出 波长、吸光度以及单位 标出最大吸收峰处的波长及吸光度 在上方注明曲线的名称 “血红蛋白及其衍生物吸收光谱曲线” 在曲线旁边标注曲线对于的物质 把姓名序号标注在空白处 光源： 可见和紫外分光光度计装有两种光源灯泡： 钨丝灯，产生可见光； 氢弧（氘）灯，产生紫外线。 由于玻璃吸收紫外线，所以氢弧灯的灯管多用石英制成，或在灯管上设有石英窗。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile . Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 色散元件（棱镜或光栅） 单色器： 光狭缝 单色器的作用是将混合光分解（色散），并 可根据需要使一定波长的单色光投射至比色 槽。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile . Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 比色杯： 形状大多为矩形。 比色杯的光径（溶液厚度）愈大，吸收的光能愈多，灵敏度愈高。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile . Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 光电元件：光电管或光电倍增管 作用：将光能转变成电能。 光电管产生光电流的大小，与光强度和波长有关。 光电管对弱光的灵敏度大，光照过强或长时间曝光灵敏 度显著下降，即“疲劳” 现象。 温度对光电管的灵敏度有影响。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile . Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 电子放大器 读数单元 读数元件 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile . Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile . Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 定量测定1、利用标准曲线计算测定物含量 先配制一系列浓度由小到大的标准溶液，分别测出它们的吸光度。然后以各管吸光度（A）为纵坐标，各管的浓度（C）为横坐标，在方格坐标纸上作图。 若被测物质对光的吸收符合光的吸收定律，则必然得到一条通过原点的直线，即标准曲线，亦称工作曲线。以后对末知浓度物质测定时，无需再作标准管，据测定管吸光度从标准曲线上即可求得测定物的浓度。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile . Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 标准曲线(浓度-吸光度曲线） 对末知浓度物质测定时，无需再作标准管，据测定管吸光度从标准曲线上即可求得测定物的浓度。 0.2 0.8 0.4 0.6 A C ● ● ● ● Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile . Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. ②对比法： 将标准品与待测样品在相同条件下显色并测定各自的吸光度： As = abCs； Ax = abCx Cx=Cs? Ax / As 由于测定体系温度、厚度及入射光波长一致，故标准与待测样品ab值相等，可用下式比较计算待测样品浓度： Evaluation only. C