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肺炎链球菌药敏试验检验结果探讨 　　摘要：目的：肺炎链球菌感染是导致细菌性疾病和死亡的主要原因。然而，肺炎链球菌却对青霉素、红霉素以及三代头孢菌素等多种抗生素耐药，不利于临床治疗。本文旨在探讨肺炎链球菌的耐药机制，进行耐药性检测和药敏试验。方法：从2009-2011年在医院进行治疗的呼吸道感染病人的痰液中分离出肺炎链球菌30株，对其药敏结果进行检测分析。结果：肺炎链球菌的耐药性存在地区差异。结论：根据药敏结果在本地区选取合理有效的抗生素对患者进行治疗，或者对易感人群进行肺炎链球菌疫苗接种。 　　关键词：肺炎链球菌 药敏试敏 检验结果【中图分类号】R4 【文献标识码】B 【文章编号】1008-1879（2012）12-0205-01 　　肺炎链球菌感染是导致细菌性疾病和死亡的主要原因，它寄居在人体上呼吸道，是一种条件致病菌，人体抵抗力下降时，肺炎链球菌即引起支气管炎或大叶肺炎，还可能导致中耳炎、脑膜炎等多种疾病。20世纪60年代以前，医学界普遍认为肺炎链球菌对青霉素高度敏感，因此，将青霉素作为治疗的首选药物。自1967年首次发现耐青霉素肺炎链球菌后，青霉素对其的治疗效果明显减弱。近年来，又陆续发现肺炎链球菌对红霉素、三代头孢菌素的耐药性，严重影响了临床治疗，故对分离出的肺炎链球菌进行药敏性分析，为临床治疗提供更多的参考。 　　1 材料和方法 　　1.1 菌株来源。2009-2011年在医院接受治疗的呼吸道感染病人的痰液中分离出的肺炎链球菌30株。 　　1.2 分离与鉴定。根据菌落形态、革兰氏染色，结合胆汁溶液试验、Optochin敏感试验、ATB自动化细菌鉴定仪等鉴定，检出的肺炎链球菌为该标本单一菌种或主要菌种。 　　1.3 药敏试验。在NCCLS的动员下，相关实验室开发了可靠的肺炎链球菌专用的药敏试验方法。主要有纸片扩散法、微量稀释法和商品试剂盒法。 　　1.3.1 纸片扩散法[1]。纸片扩散法使用羊血平板，0.5麦氏浊度菌液接种平板。纸片法简单易行，将平板上放在35摄氏度，5%CO2中培养20—24h。但纸片扩散法对一些青霉素类和头孢菌素类药物的准确性不够理想，易出现重要误差和次要误差。NCCLS对解释抑菌环和质控标准都有特别规定[2]。头孢噻肟、头孢曲松纸片药敏试验会产生15%的次要误差。 　　1.3.2 微量稀释法[1]。微量稀释法采用经离子校正的M—H肉汤加入2%-5%溶血马血的培养基，将抗生素稀释于培养基中，分装微量板。用羊血平板上的菌落制备菌液，加入微量板，在35摄氏度、普通环境下培养20—24h，然后人工判定结果，MIC的解释可以参考NCCLS的最新文件中的标准。 　　1.3.3 商品试剂盒法[1]。采用经FDA认可的商品药敏试剂盒，参照微量稀释法设计，微量板上有14对含有一种或多种浓度的测试杯。挑取菌落制成悬浮液，接种到测试杯中，在35摄氏度、普通环境下培养20—24h，然后人工判定结果。或用ATB鉴定仪直接测定MIC，MIC的解释可以参考NCCLS的最新文件中的标准。 　　1.3.4 药敏试验的质量控制。每周以肺炎链球菌标准菌株ATCC49619对10种抗生素纸片进行药敏试验。所有质控结果均符合NCCLS最新颁布的药敏质控范围。 　　2 结果 　　作为试验标本的肺炎链球菌对青霉素、万古霉素、左氧氟沙星和阿莫西林的敏感率为100%，对复方新诺明、红霉素和林可霉素的耐药率较高。所以，在该地区内治疗肺炎链球菌感染仍然以青霉素为首要选择，而复方新诺明、红霉素和林可霉素已经不能适用于该地区感染的治疗了。肺炎链球菌的耐药性存在地区差异，因此，应该根据所在地细菌的药敏试验结果，选择合理有效的抗生素进行治疗。 　　3 讨论 　　自1967年发现第一株耐青霉素的肺炎链球菌后，耐青霉素的肺炎链球菌在全球范围内明显增多。随后，医学界开始使用三代头孢菌素治疗肺炎链球菌感染，但很快又出现了对三代头孢菌素产生耐药性的肺炎链球菌[3]。 　　肺炎链球菌细胞壁上有多种青霉素结合蛋白，当抗生素与结合蛋白结合时，细菌生长受到抑制，细菌体迅速溶解。但产生耐药性的肺炎链球菌，有一种或多种结合蛋白的结构发生了变化，对青霉素的亲和力下降，导致对青霉素产生耐药[4]。低亲和力的结合蛋白是由于基因编码变异导致的，这种变异不是突变，是由于转座子直接“跳跃”至细菌的DNA上进行复制，这种变异是具有多样性，因为可以发生在不同的位点，从而获得不同类型的低亲和力的结合蛋白。 　　近年来，对耐青霉素肺炎链球菌的报道日渐增多，耐药肺炎链球菌大部分是社区感染导致的，抗生素的不合理大量使用导致细菌产生耐药性，并从一个地区传播到另一个地区。这对医学工作者而言，并不是一个好消息，因为人们无法控制由转座子、质粒或转型变异导致耐药基因扩散的