绿茶多酚对表皮HaCaT细胞光损伤的干预作用研究.docVIP

绿茶多酚对表皮HaCaT细胞光损伤的干预作用研究 　　[摘要]目的：本文旨在观察没食子儿茶素没食子酸酯 （EGCG）对中波紫外线（UVB）引起的表皮HaCaT细胞损伤，以及对细胞着色性干皮病蛋白A（XPA）和切除修复互补交叉蛋白1（ERCC1）蛋白表达的影响。方法：以30mJ/cm2 UVB照射HaCaT细胞，照光前后加入50g/mL EGCG进行干预，Western blot法检测细胞XPA和ERCC1蛋白的表达水平。结果：UVB照射后细胞内XPA和ERCC1蛋白表达水平逐渐增高，在照光后4h达到峰值，后逐渐恢复至接近正常值；加入EGCG干预可明显降低XPA和ERCC1蛋白的表达水平。结论：EGCG对紫外线光损伤的干预作用可能与调控细胞内XPA和ERCC1蛋白的表达有关。 　　[关键词]UVB；HaCaT细胞；XPA；ERCC1；EGCG 　　[中图分类号]R75 [文献标识码]A [文章编号]1008-6455（2014）17-1401-03 　　Effects of EGCG on UVB induced the photodamage in HaCaT cells 　　LIN Xiang-fei1，MIN Wei2，ZHU Xiao-fang1，LUO Dan3 　　（1.Department of Dermatology，Clinic Medical College of Yangzhou University，Yangzhou 225001，Jiangsu，China；2.Department of Dermatology，The First Affiliated Hospital of Soochow University；3.Department of Dermatology， The First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University） 　　Abstract： Objective To investigate the effects of EGCG on photodamage induced by UVB irradiation XPA and ERCC1 proteins expression in HaCaT cells. Methods HaCaT cells were irradiated with 30mJ/cm2 UVB.50 g/mL EGCG was added into the medium before or after UVB irradiation. Western blot assay was used to measure XPA and ERCC1 expression. Results 30mJ/cm2 UVB irriadiation increased the XPA and ERCC1expression which arrived at the peak at 4h after UVB irradiation.EGCG treatment significantly inhibited the XPA and ERCC1expression. Conclusion The effects of EGCG on UVB induced the photodamage in HaCaT cells maight be related with the inhibitory efficency of EGCG on XPA and ERCC1 expression. 　　Key words：UVB；HaCaT cell；XPA；ERCC1；EGCG 　　日光中的中波紫外线（UVB）是导致皮肤光损伤，如日晒伤及皮肤肿瘤发生的最重要的环境因素。UVB可引起表皮细胞DNA损伤和光产物形成，包括环丁烷嘧啶二聚体（CPDs）和6-4光产物（（6-4）PPs）[1-2]。皮肤细胞可通过核苷酸切除修复（NER）机制等对上述DNA损伤进行修复，目前已知30多种基因参与NER过程[3-4]。大量研究证实绿茶多酚具有广泛的生物学效应，如抗氧化、抗炎、抗肿瘤等[5]。我们的前期实验表明绿茶多酚主要活性成分EGCG对紫外线引起的皮肤细胞光损伤具有显著抑制作用[6-8]。本研究将观察EGCG对表皮HaCaT细胞中DNA损伤修复相关基因产物XPA和ERCC1蛋白表达的影响，从而探讨EGCG的光保护作用机制。 　　1 材料和方法 　　1.1主要试剂： RPMI 1640培养基（Gibco公司，美国）；小牛血清（杭州四季清生物公司）；EGCG（Sigma公司，美国）；GAPDH、XPA和 ERCC1单克隆抗体（Abc