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第五章 毛细管电泳法 本章要求 ⒈ 了解电泳、淌度、电渗的概念 ⒉ 了解毛细管电泳仪的结构 ⒊ 了解六种毛细管电泳分离模式 1. 毛细管区带电泳 (CZE) 用CZE时,整个系统用一种缓冲溶液 (背景电解质),根据各组分荷质比不同而分离。背景电解质仅起 传导电流的作用。 t = 0 t > 0 2. 毛细管等速电泳(CITP) 3. 毛细管等电聚焦 (CIEF) 基本操作步骤:进样、聚焦和迁移,用于生物大分子的分离。 4. 毛细管电色谱 (CEC) 分为填充柱和开管柱两种方式,可分离离子和中性分子,且可分离手性分子。 本章要求 ⒈ 了解电泳、淌度、电渗的概念 ⒉ 了解毛细管电泳仪的结构 ⒊ 了解六种毛细管电泳分离模式 * Capillary Electrophoresis Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)又称高效毛细管电泳(HPCE),是以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的液相分离技术。 CE 实际上包含电泳、色谱及其交叉内容,使分析化学得以从微升水平进入纳升水平,并使单细胞分析,乃至单分子分析成为可能。生物大分子如蛋白质的分离分析也因此有了新的转机。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 5.1 基本概念和原理 在电解质溶液中,带电粒子在直流电场的作用下,以不同的速度或速率向其所带电荷相反电场方向迁移的现象。阴离子向正极方向迁移,阳离子向负极方向迁移,中性化合物不带电荷,不发生电泳运动。 利用这些带电粒子在电场中迁移速度的不同而达到分离的技术称为电泳。 1. 电泳 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 2. 毛细管电泳:CE 以高压电场为驱动力,以毛细管为分离通道,利用被分析离子在电场作用下移动速率不同而达到分离的目的,主要用于分析在毛细管缓冲溶液中离解为离子的物质。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 毛细管的内径比头发丝还细得多 10-30千伏电压 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 3. 淌度 淌度:单位电场下的电泳速度。 绝对淌度:在无限稀释溶液中(稀溶液数据外推)测得的淌度称为绝对淌度,?0em 电泳速率:待测物从进样端到检测窗口的迁移速度,vem ?em:cm2/(s?V);
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