蛋白质结构与功能2概述.ppt

四 蛋白质的四级结构 (quaternary structure) 二、 蛋白质的分离纯化 (四) 层析 层析种类： 凝胶过（分子筛） 离子交换层析（阴离子和阳离子） 亲和层析 四、蛋白质空间结构的测定 分类：根据支持物的不同，电泳电泳可分为： 薄膜电泳、凝胶电泳……　 （二）电 泳 概念：带电颗粒在电场中向着所带电荷相反 方向移动称为电泳。 原理:不同的蛋白质的因结构、形状和带电 量的不同而有不同的泳动速度，从而 达到分析和分离蛋白质的目的 应用：电泳技术是生化常用分析技术之一 利用压力或离心力强行使水和小分子杂质通过超滤膜(一种半透膜)除去，而蛋白质留在膜上，称为超过滤 将蛋白质溶液放在半透膜的袋内，置于流动的适当的缓冲液（如纯水）中，小分子杂质（如硫酸铵、氧化钠等）从袋中透出，而蛋白质保留于袋中从而将蛋白质纯化，这种方法称为透析 （三）透析 透析工作图 半透膜原理 带正电荷多蛋白紧密结合 带负电荷多蛋白流过层析柱 阳离子交换树脂工作示意图 分子筛层析 亲和层析工作示意图 蛋白质 载体介质 配体 结合 洗脱 洗脱介质 (六)超速离心 三、多肽链中氨基酸的顺序分析 第一步： 分离提纯蛋白质 ，测定NH2末端的数目，确定蛋白质分子是 由几条肽链构成的，并分离出 每条肽链。测定肽链的分子量,计算组成该肽链的氨基酸残基数。及每种